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标题: 谁能告诉我如何分离UTP和UDP-GlcNAc [打印本页]

作者: minjun3424 时间: 2010-6-15 10:55 标题: 谁能告诉我如何分离UTP和UDP-GlcNAc

我想利用C18的柱子分离UTP和UDP-GlcNAc，之前有人用HPLC，以三乙胺-醋酸为流动相能够很好的分离UDP-GlcNAc，为什么我用20mM的三乙胺-醋酸时没有峰呢？

作者: amelican_beauty 时间: 2010-6-15 11:37

朋友，色谱柱是同一类型的吗，检测波长设置有没有问题，楼主能不能把信息补充做一点，进的是对照品吗？

作者: maomi530 时间: 2010-6-15 13:43

可能性很多，样品浓度、流动相比例、三乙胺-醋酸浓度、检测波长都会影响。

作者: DragonsABC 时间: 2010-6-15 13:43

楼主，用的是什么检测器

作者: aa_tang 时间: 2010-6-16 00:55 标题: 回复 #1 minjun3424 的帖子

用C18柱分离UTP和UDP-GlcNAc，以三乙胺-醋酸挥发性离子对试剂为流动相，是可以的。从原理上来讲，是利用三乙胺与UTP和UDP-GlcNAc上的P形成离子对，增强保留性。该流动相体系的关键是离子对试剂的浓度和pH值，曾用100mM的三乙胺-醋酸作流动相，同时调pH 7.4 来分离过类似结构的化合物。建议楼主从缓冲液离子强度和pH值来优化色谱条件，同时洗脱梯度起始有机相的比例也很关键。多试试吧。

作者: thereyoube 时间: 2010-6-16 10:34 标题: 回复 #1 minjun3424 的帖子

是正离子状态?如果是负离子状态, 可以试一试降低三乙胺-醋酸的浓度用柱后修饰法.

见到报道2.5.mM的乙酸胺要比20mM 的乙酸胺离子化好. 在ESI离子源中.

另外, 要非常小心用三乙胺, 在正离子状态下, 会严重抑制离子化. 而且TEA用了后, 非常难从系统中除去[102]. 建议轻易不要用TEA. 除非系统只用负离子状态.

作者: entd_jps 时间: 2010-6-16 10:34

朋友，请确认文献的条件，看看它是不是用的C18柱
以及文献的色谱条件等等

作者: lclong0213ng 时间: 2010-6-16 10:35

QUOTE:

原帖由 minjun3424 于 2010-6-15 10:55 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
我想利用C18的柱子分离UTP和UDP-GlcNAc，之前有人用HPLC，以三乙胺-醋酸为流动相能够很好的分离UDP-GlcNAc，为什么我用20mM的三乙胺-醋酸时没有峰呢？

我觉得可能是PH值不对造成的，建议仔细核对。

作者: liuzhikunwq 时间: 2010-6-17 13:47

文献报道的分离开的用的是什么柱子？

作者: ccf335 时间: 2010-6-17 13:47

“之前有人用HPLC，以三乙胺-醋酸为流动相能够很好的分离UDP-GlcNAc，为什么我用20mM的三乙胺-醋酸时没有峰呢？ ”

那之前用的是什么浓度呢？

作者: 13913840328 时间: 2017-12-5 10:06

楼主你好，请问您UDP-GlcNAc的分离和检测做成功了吗？想请教您详细的方法学，谢谢。

作者: 13913840328 时间: 2017-12-5 10:07

楼主你好，请问您UDP-GlcNAc的分离和检测做成功了吗？想请教您详细的方法学，谢谢。

作者: 13913840328 时间: 2017-12-5 10:08

楼主你好，请问您UDP-GlcNAc的分离和检测做成功了吗？想请教您详细的方法学，谢谢。

作者: 13913840328 时间: 2017-12-5 10:11

楼主你好，请问您UDP-GlcNAc的分离和检测做成功了吗？想请教您详细的方法学，谢谢。

作者: 13913840328 时间: 2017-12-5 14:43

请教各位有UDP-GlcNAc分离和检测的详细方法吗？谢谢！

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