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标题: 【请教】聚焦不清如何消物镜像散呢？ [打印本页]

作者: 77466 时间: 2010-6-29 11:23 标题: 【请教】聚焦不清如何消物镜像散呢？

请各位前辈指点迷津：聚焦不清如何消物镜像散呢？先谢过啦！

作者: 蓝天 时间: 2010-6-29 11:23

聚焦不清消象散？比较难操作也不太合理吧，为什么聚焦不清呢？有没有例子说明？

作者: 随心所欲 时间: 2010-6-29 11:30

如果你用的是Gantan的CCD，找一个非晶区（比如碳膜），在DM程序中，用View来观察连续图像（在你要做高分辨的倍数下），选择Process中的Live FFT。

如果有像散，非晶图像的Fourier变换谱应该是椭圆的，用消像散器把它调圆就可以了。消成如图所示的形状就差不多了。

作者: 蓝天 时间: 2010-6-29 11:30

这样在非聚焦下也能适用么？没试过呢，呵呵。

作者: 随心所欲 时间: 2010-6-29 11:30

呵呵比如在44000×下观察蛋白时，有时不论怎样聚焦也感觉不清楚。这时就需要消物镜像散了。不知我说清楚了没？

作者: 77466 时间: 2010-6-29 11:31

非常感谢啊！知道了，下次试试。

可是不好意思问一下：在消像散时，是不是用多功能钮X和Y消呢？

可是有时只有中心一个亮斑，而不是您给的图中那样的衍射环。

作者: 蓝天 时间: 2010-6-29 11:31

那就是有污染了？还是说你的蛋白是被包裹在包埋材料里，而后者太厚了？

作者: 随心所欲 时间: 2010-6-29 11:31 标题: 回复 #6 77466 的帖子

你用的是Tecnai吧，还好我上个星期去huangwendy那里看了看怎么用。你要选OBJ STIG那一项，再用多功能钮调。环的的大小和多少跟很多因素有关，比如非晶区的厚度，电镜的电子枪，还有离焦量，非晶区越薄越好。

作者: 77466 时间: 2010-6-29 11:32

呵呵我用的是Tecnai Ｇ20
我是选择stigmator中的objective，然后用MF-X,Y调．多谢啦～

作者: 77466 时间: 2010-6-29 11:32

那么如果不用CCD中的FFT功能，而直接用MF-X,Y消像散到什么程度算ok呢？

作者: 随心所欲 时间: 2010-6-29 11:32

看样品或微栅孔边缘的菲涅尔条纹，调到改变物镜电流时，亮纹或暗纹同时出现同时消失就可以了，不过这个方法一般用在中等放大倍数，实在没有CCD在高倍也只能用这个方法调。

作者: 蓝天 时间: 2010-6-29 11:32

这个方法的确只是适用较低倍像，其实光路理好了，一般低倍不用消像散的。高倍率我喜欢看无定形膜边缘，最后是C颗粒看起来圆润，不过这个要找感觉才是，而且没有live fft准确。

作者: 蓝天 时间: 2010-6-29 11:35

ps：我见到日本一个工程师，调像散坚持不用ccd，直接800K显微镜看，不过的确很漂亮，但这需要感觉。

作者: 77466 时间: 2010-6-29 11:35

好。知道了！多谢！

作者: 蓝天 时间: 2010-6-29 11:36

不太舍得用ccdlive 模式调

作者: 阿九 时间: 2010-6-29 11:38

很有帮助，收藏了！！

作者: 蓝天 时间: 2010-6-29 11:38

4w倍左右一般物镜像散不是非常严重的话不会有什么明显影响吧本来蛋白衬度就低聚焦看不清楚很可能不是象散的问题

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