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标题: 【求助】体外卵母细胞成熟用的FSH和LH如何稀释 [打印本页]

作者: remonte 时间: 2013-12-19 15:02 标题: 【求助】体外卵母细胞成熟用的FSH和LH如何稀释

我要体外培养牛卵母细胞，并成熟，准备用sigma的FSH和LH，查阅文献中的添加方法分别是5微升/ml和1微升/ml，但是包装上没有稀释方法，并且只标注每瓶的含量是50单位和25单位，网站上也没有。

请问有哪位做过这方面研究的同仁给一些帮助和建议，很着急呀，有点上火了。

作者: qqshepherd 时间: 2013-12-19 15:03

应该是以多少单位每ml是最科学的，这个在牛的卵母细胞成熟上范围比较广

作者: remonte 时间: 2013-12-19 15:04

我觉得产品包装上写的单位数量并不是标准的国际单位，不知道产品标识的单位数是什么意思？

作者: qqshepherd 时间: 2013-12-19 15:05

添加方法分别是5微升/ml和1微升/ml ...

据我所看过的文献,这两种激素的添加量都是以ug/ml或者IU/ml作为单位的.你如果真的看见是以"微升/ml"

作者: qqshepherd 时间: 2013-12-19 15:05

FSH和LH买回来,我们都是直接用超纯水溶解的

作者: zhy平平 时间: 2013-12-19 15:07

用培养基稀释！！！！！

作者: qqshepherd 时间: 2013-12-19 15:08

Storage/Stability The product can be reconstituted with 1 ml of water or phosphate buffer. The vial (dry powder) contains 0.1 mg of salts from 50 mM phosphate buffer, pH 7.4.

When reconstituted, store at 2-8 °C for up to one month. The product should be kept sterile to limit bacterial growth, which will denature the protein.

作者: seagate 时间: 2013-12-19 15:09

水和生理盐水都可以。防止黏在容器壁上，可以在溶液中先加少量BSA，完全溶解后加入FSH或LH粉剂，让粉剂自己慢慢溶解，千万不要振荡或用注射器吹打。生物制品忌用这些破坏性的操作。

作者: lyxsqs 时间: 2013-12-19 15:10

干粉的话用PBS或者培养基稀释,分装成存储液。

比如：我买回来的LH是干粉，瓶子上写了100单位（IU），

而LH在成熟液中的使用浓度为10mIU/ml（毫单位每毫升），于是我配成1IU/ml的储存液，即1000mIU/1000ul,即1mIU/ul，配液时每毫升培养液加入10ul LH溶液即可。

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