分析测试百科

标题: 【求助】western显影时，整张膜全是荧光 [打印本页]

作者: sistis 时间: 2014-2-20 17:52 标题: 【求助】western显影时，整张膜全是荧光

最近做western，显影时，加上显色液以后，关灯，整张膜全是荧光，显影出来片子是全黑的，哎，很郁闷，不知道这是咋回事～～

作者: zsxan1990 时间: 2014-2-20 17:52

呵呵,LZ肯定是新手,因为这些问题大家刚开始做的时候应该都遇到过.我当时做的主要原因是A,B液的稀释比例太高,建议再多稀释一下,比如原来是20倍稀释的现在变成40倍,而且整张膜全黑的原因可能是你A,B液没有吸干净,溢出很多的话片子就黑了.这个是我个人的看法,希望大家也谈谈你们是怎么想的,怎么改善的.

作者: jujuba 时间: 2014-2-20 17:52

还有可能是你的二抗没洗好，所以背景会很高。有目的条带吗？

作者: panda王 时间: 2014-2-20 17:53

显影液之类的液体有没问题？

作者: 小荷尖尖 时间: 2014-2-20 17:53

不用看了.一抗问题!
换一抗吧

作者: ero11 时间: 2014-2-20 17:53

可能一抗浓度太高。

作者: am10 时间: 2014-2-20 17:54

存在一下两者可能：
1。你的显影液没有吸干净，导致这个问题。这个可能性比较大。
2. 你的二抗没有洗好。

作者: am10 时间: 2014-2-20 17:54

三种可能之一
1、一抗的问题，换吧
2、二抗漂洗漂洗不彻底
3、显影液比例反了

作者: PINK 时间: 2014-2-20 17:54

除了上面提到的原因的话，封闭也有可能会影响背景的~！可以延长封闭的时间

作者: shanzhapia696 时间: 2014-2-20 17:54

哈哈,我也碰到过同样的问题,有可能是一抗孵育时间过长,或者是二抗浓度太高,没有漂洗干净,AB液没有吸干净也有可能,把二抗浓度降低一点试试吧

作者: shanzhapia696 时间: 2014-2-20 17:55

补充一下,其实荧光太强也不是不能曝片,你压片只压一秒钟立即显影,估计条带还是可以出来的

欢迎光临分析测试百科 (http://bbs.antpedia.com/)