标题:
【求助】如何使用聚乙二醇浓缩蛋白质
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作者:
nikun230
时间:
2014-2-27 16:48
标题:
【求助】如何使用聚乙二醇浓缩蛋白质
今天没法用站内搜索
只能发这贴了
小弟以前都用硫酸铵沉淀蛋白
现在打算改用聚乙二醇
请各位介绍下用聚乙二醇浓缩蛋白质的方法
是将聚乙二醇粉末涂抹在透析袋外部好
还是直接往蛋白溶液中加入聚乙二醇
最好大家给我个具体操作过程吧~~~
作者:
mamamiya
时间:
2014-2-27 16:48
当然是将聚乙二醇一般是PEG20000撒在透析带的烧杯里,要盖住一些
涂在外部也太少了吧
那才能吸多少
加在溶液里怎么分啊,还会直接作用于某些蛋白质
作者:
remenb
时间:
2014-2-27 16:49
用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用最广的一种。将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋(无透析袋可用玻璃纸代替),结扎,把高分子(视使用的透析袋孔径而定,常用0.45um)聚合物如聚乙二醇(6 000-12 000碳蜡)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可将吸水剂配成30%-40%浓度的溶液,将装有蛋白液的透析袋放入即可。吸水剂用过后,可放入温箱中烘干或自然干燥后,仍可再用。
作者:
yonger
时间:
2014-2-27 16:50
你用过硫酸铵沉淀蛋白质吗? 能给我一份详细的过程吗?谢谢!
作者:
tuuu2
时间:
2014-2-27 16:50
我这里有PEG1000-20000的分子量的,现货供应,需要的话联络我
wuyingwuzong261725@126.com
,以前我们是做抗体的,检测浓度太低的时候,就用PEG浓度,就是拿托盘放上透析袋装好的样品溶液,散上PEG,等这就可以了。
作者:
bongte
时间:
2014-2-27 16:54
玻璃纸也可以代替透析袋啊,可是它的截留分子量是多少呢?还有,如果用PEG6000,倘若用的透析袋截留分子量高,如果为6000以上,是不是PEG也会融入到透析袋内啊
作者:
plaa
时间:
2014-2-27 16:54
QUOTE:
原帖由
bongte
于 2014-2-27 16:54 发表
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玻璃纸也可以代替透析袋啊,可是它的截留分子量是多少呢?还有,如果用PEG6000,倘若用的透析袋截留分子量高,如果为6000以上,是不是PEG也会融入到透析袋内啊 ...
用PEG进行浓缩,PEG肯定会渗入到透析袋内的,PEG是长链分子,而透析袋截留分子量是针对球形分子来讲的,因此,即便PEG的分子量大于透析袋的截留分子量,它仍然会进入透析袋内。
用PEG浓缩后样品,最好再对缓冲透析,除去混入的PEG。
作者:
yes4
时间:
2014-2-27 16:54
为什么改为PEG呢? 饱和硫铵不好吗?
作者:
caihong
时间:
2014-2-27 16:57
要浓缩超滤岂不更好?而且也不需要除盐
作者:
qhyu
时间:
2014-2-27 16:58
超滤浓缩有时候会吸附很多目的蛋白,造成蛋白的大量损失;而饱和硫酸铵有时也会形成不可逆的变性,所以还是需要按照自己的蛋白摸索不同的浓缩方法。
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