分析测试百科

标题: 【求助】含有葡萄糖的液体可以高压灭菌吗？ [打印本页]

作者: gemei0115 时间: 2014-4-21 11:16 标题: 【求助】含有葡萄糖的液体可以高压灭菌吗？

我是从文献获得的BUFFER配方，里面含有葡萄糖，因为以前配过SOC培养基，那里面的葡萄糖是单独过滤后再加到高压后的培养基里的，因此我在考虑是不是只要是含有葡萄糖就都得单独加，而不能一起配好后高压灭菌。是不是因为高温高压情况下葡萄糖会发生化学反应呢？可是提质粒的Solution I里也是含有葡萄糖的，是可以一起高压的。到底怎么回事呢？请高手指点！

作者: XYZQ 时间: 2014-4-21 11:16

葡萄糖灭菌温度过高会产生糠醛，培养基颜色变深，糠醛对菌体生长不利。
如果培养基中的葡萄糖浓度很低，就不用单独灭菌，如果葡萄糖很高，培养条件又很严格，就单独灭菌。量少的话过滤，量多的话，实验室一般115度灭菌15min足够了，工厂一般115度20~30min。

作者: 2541 时间: 2014-4-21 11:17

我想问:提质粒的Solution I里含有葡萄糖,这个溶液的高压条件是?

作者: mamamiya 时间: 2014-4-21 11:17

提质粒的Solution I中含有葡萄糖，我以前一开始用的高温灭菌条件是0.1MP，20min，灭菌后发现Solution I变成了浅黄色，后来我用的是0.05mp，30min，灭菌的效果就很不错，建议楼主用0.05mp，灭菌30min便可以！

作者: gemei0115 时间: 2014-4-21 11:18

昨天我已经试过高压灭菌了，出现了很奇怪的现象，有两瓶BUFFER和wxf1206_0站友描述的情况一样，液体变成了浅黄色，但另外两瓶同样含有葡萄糖的BUFFER没有变色。这是怎么回事呢？是不是版主所说的跟葡萄糖的浓度有关？那多少才是浓度低，多少才算高呢？我算了一下，我的BUFFER里变色的两瓶一个是0.2％，另一个是0.6％，而没变色的一个是2％，另一个是0.09％，而提质粒的Solution I中葡萄糖含量为0.88％，似乎找不到甚么规律：（
我的BUFFER是用来洗涤细胞的，也不知道糠醛会不会对细胞有影响？
另外我们实验室的高压灭菌锅没有温度显示，只有压力显示。不知道楼上站友提到的mp是甚么单位，一般对压力的描述好像多用“磅”吧

作者: ritou1985 时间: 2014-4-21 11:19

提质粒的Solution I只要0.1mPa，15min就行了，分子克隆这么写的。
多少葡萄糖才是浓度低，多少才算高？这个我也不太清楚，我一般5%以下就不分开消了，因为培养的菌好像不受影响。

作者: one 时间: 2014-4-21 11:20

这个我也有做过,当时是115度20分钟做的,溶液也有点变色.
但是据我的了解,溶液1影响不大的,它主要的功能就是把菌体混合均匀,关键的是溶液2和3,NAOH的溶度一定不能错,而且溶液2要新鲜配制.

作者: XYZQ 时间: 2014-4-21 11:20

105度15min

作者: mimili_901 时间: 2014-4-21 11:20

我好像不用灭菌也用得好好...

作者: ero11 时间: 2014-4-21 11:21

如果有条件可以用0.22微米的膜过滤.

作者: duoduo 时间: 2014-4-21 11:21

115没有问题，120度就会变色，不过如果提质粒是不影响使用的

作者: bring 时间: 2014-4-21 11:21

主要是控制压力，一般控制在8-10磅

作者: 3648755 时间: 2014-4-21 11:22

115度15分钟,严格控制压力,过了就会变黄.

作者: 987789 时间: 2014-4-21 11:22

115度15分钟

欢迎光临分析测试百科 (http://bbs.antpedia.com/)