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标题: 【求助】为什么转膜时蛋白条带都花掉了 [打印本页]

作者: plaa 时间: 2014-4-21 16:06 标题: 【求助】为什么转膜时蛋白条带都花掉了

大家帮我看看为什么转膜时蛋白条带都花掉了

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作者: 逗号是句号 时间: 2014-4-21 16:06

转膜液有问题，之前也出现过这种事情。我的转膜液中加有20％的甲醇，但是甲醇加的早了，会造成其他药品降解，所以刚开始转膜时，总是第一次或是使用刚配的转膜液才好，后来就在转膜之前再加甲醇，这个问题就解决了。

作者: plaa 时间: 2014-4-21 16:07

我的转膜液是转膜前一天刚配的，放了一天应该没什么问题吧?

作者: plaa 时间: 2014-4-21 16:08

感觉蛋白好像是从某个地方流走了，就是图片照的不清楚，蛋白条带就跟溪水一样，往一个地方流

作者: plaa 时间: 2014-4-21 16:09

我也遇到了这样的问题，郁闷啊
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=9376675&sty=1&tpg=1&age=0')

作者: 笑弯了腰 时间: 2014-4-21 16:09

我个人认为，你的主要问题是在第四泳道，是其流花了即跑散了．其余的非常好，可能原因就是你在三＼四泳道有个泳道没有加样，因为如果你在电泳中加样的首尾泳道不加加样缓冲液，样品很容易跑花，建议你连续上样，或在中间没有加样品，你上加样缓冲液，试试看

作者: ROSE李 时间: 2014-4-21 16:12

放一天也有问题，我以前这样想的，结果就是不行。你试着在转膜之前再加甲醇就知道了。

作者: 101010 时间: 2014-4-21 16:12

转膜前蛋白染得怎样？

作者: nvdabing 时间: 2014-4-21 16:12

问题已解决，造成我蛋白条带漂移的原因是膜夹的不紧，具体原因与drake015斑竹说的一样，其原话是：
因为转膜仪使用时间太长，两块板之间的海绵由于长期使用变得很薄。当按照阴极-海棉-滤纸-胶-膜-滤纸-海绵依次放好后两块板不能压紧，因而在胶和膜之间可能存在潜在的间隙，电转移时蛋白从胶和膜之间的空隙中流走
今天我在两层海绵之间多加了几层滤纸，转出的条带非常好。
有兴趣的战友可看下这个网页
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=1752234&sty=3&keywords=%D7%AA%C4%A4+%C6%AF%D2%C6')
谢谢各位热心的帮助。

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