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标题: 【求助】超滤浓缩管的清洗与保存 [打印本页]

作者: pulala 时间: 2014-5-10 10:14 标题: 【求助】超滤浓缩管的清洗与保存

Millipore的超滤浓缩管浓缩过蛋白质该如何清洗和保存呢？
谢谢

作者: leifengta 时间: 2014-5-10 10:14

40度0。1M NAOH液清洗两次，纯水离心清洗一次。把管子有膜的部分浸润在液体里。

作者: mingming0638 时间: 2014-5-10 10:15

清洗超滤管的溶液要用0.22um滤膜先过滤
一般0.5N的NaOH浸泡半小时，然后纯水清洗几次，不用的时候，用20％乙醇浸泡滤膜部分，4度保存，防止染菌和干裂

作者: 静夜思 时间: 2014-5-10 10:15

一般不建议重复使用！

作者: vivian4123 时间: 2014-5-10 10:16

QUOTE:

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一般不建议重复使用！

如果是浓缩同一个蛋白的话应该还是可以的，不建议重复使用只是厂商的愿望。

作者: october7 时间: 2014-5-10 10:16

那没有使用过的呢？需要浸泡吗？还是直接密闭放在室温下就可以？

作者: cbou876 时间: 2014-5-10 10:17

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那没有使用过的呢？需要浸泡吗？还是直接密闭放在室温下就可以？

对

作者: cbou876 时间: 2014-5-10 10:17

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一般不建议重复使用！

确实不建议重复使用，不过毕竟比较贵，清洗一下，重复用5、6次是可以的，所以要注意清洗和保存

作者: dmg 时间: 2014-5-10 10:21

我们实验室也有这种超滤浓缩管，应该先用灭菌的去离子水在小套管里轻轻吹打，然后加入灭菌的去离子水离心大概20分钟，接着加入70％的乙醇离心20分钟，最后用灭菌的去离子水封住套管的过滤膜，4摄氏度保纯。

作者: leifengta 时间: 2014-5-10 10:21

想做好的实验出、好的数据、发好的文章。
用的东西就要是最好的！

作者: birdfish 时间: 2014-5-10 10:21

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想做好的实验出、好的数据、发好的文章。
用的东西就要是最好的！

楼上说的这个是不是把液体放进去
然后在离心机上转的东东哦

作者: birdfish 时间: 2014-5-10 10:22

如果是的话
我曾经把那个滤膜都戳破过
这么脆弱的东西还能重复使用么

作者: newway 时间: 2014-5-10 10:22

看来有钱人还是多啊
偶都用N多次，只要你测试下面管子中的成分没有蛋白的话都可以继续用（紫外检测）
注意蛋白质分子量要在管子合适的范围，转数也要合适的话绝对可以用很多次
当然仅仅用来浓缩蛋白，若想脱盐或除杂蛋白就不好说了

作者: 逗号是句号 时间: 2014-5-10 10:22

建议使用sartoriuse的超滤离心管，它比millipore的便宜，而且更专业。sartoriuse使用的是切向过滤，不容易堵膜，过滤效率高，可重复使用。millipore的是垂直过滤，效率不高，容易堵膜，重复使用2-3次就不行了。

作者: damingxia0904 时间: 2014-5-10 10:23

millipore也是切向的

作者: xevin 时间: 2014-5-10 10:23

现在国内有些公司有生产可重复使用的超滤膜实验室设备,价格是国外膜设备的三分之一左右,性能也好,处理量也大.通常是用碱洗后纯水洗涤.

作者: standbyme 时间: 2014-5-10 10:24

我也买了,正准备用来脱盐和滤掉小分子蛋白,请问大家用之前时需要处理一下膜吗?虽然有说明书,但还是不明白.而且一个膜配了两个1.5ml的EP管.据说该膜可以重复用?

作者: standbyme 时间: 2014-5-10 10:24

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看来有钱人还是多啊
偶都用N多次，只要你测试下面管子中的成分没有蛋白的话都可以继续用（紫外检测）
注意蛋白质分子量要在管子合适的范围，转数也要合适的话绝对可以用很多次
当然仅仅用来浓缩蛋白，若想脱盐或除杂蛋白就不 ...

不能用来脱盐吗?说明书上说可以的呀?

作者: newway 时间: 2014-5-10 10:24

超滤脱盐太容易了

作者: INK 时间: 2014-5-10 10:25

我也打算想买用来蛋白质脱盐呢，我的蛋白大约在4-6万间，不知道买谁家的超滤离心管，还有是我要的话，那个滤膜需要是多大的呢，是3万还是用1万的呢，国内那些公司有卖的啊！

作者: leifengta 时间: 2014-5-10 10:25

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我也买了,正准备用来脱盐和滤掉小分子蛋白,请问大家用之前时需要处理一下膜吗?虽然有说明书,但还是不明白.而且一个膜配了两个1.5ml的EP管.据说该膜可以重复用? ...

如果是MILLIPORE 配两个EP管的目的:如果你需要上面的部分.怎么办?那就可以倒过来离,这样就可以取到上面的部分!

作者: greenbee 时间: 2014-5-10 10:26

我也打算想买用来蛋白质脱盐呢，我的蛋白大约在4-6万间，不知道买谁家的超滤离心管，还有是我要的话，那个滤膜需要是多大的呢，是3万还是用1万的呢，国内那些公司有卖的啊！

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脱盐可以用desalt的小柱子

作者: daod 时间: 2014-5-10 10:26

我用了两天的desalt的5ml小柱子了，但是我的蛋白和盐在一起都出来了，我是先用水平衡，然后上样，最后在用水跑结果就是一起出来了，郁闷啊！

作者: hold住 时间: 2014-5-10 10:27

如果你的蛋白比较大一点超过3KD用来脱盐是很好的了。。非常好用。。你们说的MILLIPORE的1。5ML的EP管的是处理500UL的样品的。。这个是垂直超滤膜的因为处理量本来就少。在切向留蛋白损失比较大。但是他处理量4ML，15ML两种是切向留的。有什么使用的疑问随时可以给我PM消息。我是经销MILLLIPORE的产品的。呵呵如果你的蛋白比较大一点超过3KD用来脱盐是很好的了。。非常好用。。你们说的MILLIPORE的1。5ML的EP管的是处理500UL的样品的。。这个是垂直超滤膜的因为处理量本来就少。在切向留蛋白损失比较大。但是他处理量4ML，15ML两种是切向留的。有什么使用的疑问随时可以给我PM消息。我是经销MILLLIPORE的产品的。呵呵

作者: pulala 时间: 2014-5-10 10:27

如果是MILLIPORE 配两个EP管的目的:如果你需要上面的部分.怎么办?那就可以倒过来离,这样就可以取到上面的部分!

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不明白怎么个弄法呢?

作者: hold住 时间: 2014-5-10 10:28

在1。5ML的管子里有个小套管。套管靠近中间部位有膜，离心的时候套管容积大的那面朝上，蛋白不是最后截留在膜上了吗，离心好了把套管反国来。大容积的那面朝EP管离心不就都回收到管子里了吗

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