标题:
【求助】蛋白含量10ug/ul,还能浓缩吗?
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作者:
docsy
时间:
2014-5-10 18:00
标题:
【求助】蛋白含量10ug/ul,还能浓缩吗?
相关疾病:
黑素瘤
大家好:
我的样品是恶性黑色素瘤裂解后,测蛋白含量大约10ug/ul,
目的蛋白350kd,还能浓缩吗??可以用透析袋吗?
谢谢!!
作者:
youyou99
时间:
2014-5-10 18:01
标题:
回复 #1 docsy 的帖子
这个要看蛋白溶解度了
不过这个浓度已经很高了,为什么还要浓缩呢?
用超滤离心管更好一些,透析袋不容易控制条件,并且损失会多一些
作者:
docsy
时间:
2014-5-10 18:01
因为此样品的免疫荧光有结果,而做出来的western此样品没有条带,阳性对照有条带。
谢谢!!
作者:
04906
时间:
2014-5-10 18:01
可以浓缩,但是浓度不宜超过做标准曲线中最大浓度对应的那个点,毕竟标准曲线只是根据几个点做的趋势线,如果超过这几个点的范围,即使在曲线上可能也不是很准确的浓度.
作者:
7437654
时间:
2014-5-10 18:02
我个人感觉你做不出来不是应为蛋白不够浓的问题。。。这个目的蛋白分子量几乎突破WB极限了。。。。。。不知道你的阳性对照是使用的什么?
作者:
docsy
时间:
2014-5-10 18:02
to 楼上的:
因为免疫荧光有结果,所以老板让浓缩试试,唉!
阳性对照是大鼠脑组织,昨天已经ECL发光爆出来了,我用了好几个月!!
谢谢!!
作者:
了了
时间:
2014-5-10 18:02
为什么还要浓缩呢,这样的蛋白浓度保存最佳了.
作者:
30moonriver
时间:
2014-5-10 18:03
哇,这么高的浓度还要浓缩啊?
如果有表达的话,WB应该可以检测出来的啊。免疫荧光的灵敏度不如WB的。可能是样品处理出了问题。
作者:
qiangren789
时间:
2014-5-10 18:03
相关疾病:
黑素瘤
我也觉得浓缩也不一定有用,可是老板说免疫荧光有结果,就让浓缩试试。
样品是“恶性黑色素瘤”的组织,阳性对照也是组织啊,处理方法相同的啊?
谢谢!!
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