首先,SDS-PAGE电泳时分子量marker不能作为绝对标准,只是一个参考值。
其次,有的蛋白(如组蛋白和一些易形成dimer的蛋白,还有一些比较难变性而又形成紧凑的球形结构的蛋白)在用常规方法电泳时会出现异常行为(表观分子量与实际分子量不符)。
您可以用关键词:anomalous electrophoresis behavior搜一下。
比如:下面的几篇文章都或多或少提到这一现象。至于很详细的解释一般是1950年左右的文献,不好找。您可以参考下面的文献,结合您的蛋白特性分析一下:
1 很多公司关于组蛋白的产品介绍,有引用文献。
2 Evidence for Sodium Dodecyl Sulfate/Protein Complexes Adopting a Necklace Structure
M. Samsó, J.R. Daban, S. Hansen i G.R. Jones
Eur. J. Biochem. 232 (1995) 818 824.
3 Molecular Biology of the Cell
Vol. 14, 4758–4769, December 2003
Glom Is a Novel Mitochondrial DNA Packaging Protein in Physarum polycephalum and Causes Intense Chromatin Condensation without Suppressing DNA Functions
4 INFECTION AND IMMUNITY, Dec. 2002, p. 6976–6986 Vol. 70, No. 12
0019-9567/02/$04.000 DOI: 10.1128/IAI.70.12.6976–6986.2002
Expression of a Novel Leishmania Gene Encoding a Histone H1-Like Protein in Leishmania major Modulates Parasite Infectivity In Vitro
若您在检索上述文献时存在困难,请到SOS求助或pm给我。
希望您能找到答案。作者: qqq111 时间: 2014-6-19 12:30
1,以前对于这个问题,似乎听实验室的师兄说,SDS-PAGE鉴定表达的外原蛋白,分子量和Marker有一定的出入,一般在10kD左右浮动还是可以接受的,也许就是你所遇到的这种情况.不过最终的结果还是要看你的WB结果了;
2,也许有可能是你的蛋白表达过程中提前终止,那就没有办法,只有更换载体;作者: NBA 时间: 2014-6-19 12:31