标题:
【求助】请帮忙分析这张2D图
[打印本页]
作者:
windboy
时间:
2014-6-19 13:37
标题:
【求助】请帮忙分析这张2D图
细胞培养后的全蛋白2D图,由于横竖纹太多,不知问题出在哪里,新手还请大家帮忙分析
图片附件:
24285280.snap.jpg
(2014-6-19 13:37, 33.3 KB) / 该附件被下载次数 3
http://bbs.antpedia.com/attachment.php?aid=25136
作者:
nn255
时间:
2014-6-19 13:37
你的marker真漂亮,怎么做的哦?请教
作者:
windboy
时间:
2014-6-19 13:38
maker是在低熔点琼脂糖上做个孔。
作者:
redbutterfly
时间:
2014-6-19 13:38
你把实验操作过程和数据传上来看一下,从图上不能准确判断,我觉得是聚焦不好,还可能是核酸影响
作者:
xueyouzhang
时间:
2014-6-19 13:39
可能的原因以及解决办法:一,第二向电泳缓冲液中含有杂质,或者电泳装置不干净,建议使用新鲜配置的电泳缓冲液,并将玻璃板和电泳槽清洗干净;二,琼脂糖固定液含有杂质,建议使用新鲜配置的琼脂糖固定液。
作者:
windboy
时间:
2014-6-19 13:39
我的低熔点琼脂糖的确用了4、5次了,可能有杂质了。我再试试。
我今天把DNase15ul(1mg/ml)和RNase5ul(1mg/ml)处理的样品跑了个EB琼脂糖,在溴酚蓝一线和滞后的地方有大片、很亮的核酸,应该是被消化后的结果吧,但是孔里也还有大分子的核酸,是不是应为这部分核酸的作用?
11cm胶条
水化 50V 14小时(20℃) 主动水化
S1 250V 线性 60分钟 除盐
S2 1000V 快速 60分钟 除盐
S3 8000V 线性 4小时 升压
S4 8000V 快速 50,000伏小时 聚焦
S5 500V 快速 任意时间 保持
设置等电聚焦时的温度。(20℃)
还请各位帮忙
作者:
windboy
时间:
2014-6-19 13:39
核酸酶加入后只在4度放置了1h,不知道时间够长么?由于没有加其他蛋白酶抑制剂,完全靠8M尿素所以不敢时间太长,温度太高
欢迎光临 分析测试百科 (http://bbs.antpedia.com/)
Powered by Discuz! 5.5.0