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标题: 【求助】那里可以买到小包装的Sepharose CL 4B或者4FF? [打印本页]

作者: xueyouzhang    时间: 2014-6-27 15:44     标题: 【求助】那里可以买到小包装的Sepharose CL 4B或者4FF?


联系了几个代理公司,都只卖1L的大包装,我用几十ml也就够了。那里可以买到呢?国产的也可以

作者: nn255    时间: 2014-6-27 15:44

一般公司是只买1L,但是国产应该是可以卖小包装的.
作者: xueyouzhang    时间: 2014-6-27 15:45


Sepharose CL 4B
是什么胶呢?凝胶过滤吗?如果是滤胶过滤的话几十ml能干什么呢?还是买一个大包装的好。
如果不是凝胶过滤,是激活好的亲和基质的话,应该有小包装。
如果你是北京的话可以联系:010-62817543 13301170466,这个代理商我们在他们那里买了很多东西,他们代理安玛西亚的东西,价钱还是很不错。比价能给到1:9左右。
祝你能顺利买到东西。早日完成实验。
或者你打电话查北京通用公司的电话,他们有给你代理商的。

作者: xueyouzhang    时间: 2014-6-27 15:46


谢谢,我联系看看,我要处理的样品挺少的,所以几十ml就够,而且我做完了实验室也不大会有人用,多买就浪费了,何况进口的1L要7000块。
查到中科院生化工程中心有个4B的介质,不知道性质怎么样,跟进口的差的多吗?

作者: mamamiya    时间: 2014-6-27 15:46

中科院生化工程中心是不是就是中科院过程所呀,在中关村北二条,他们的所长苏志国,他们自己也做胶,去他们那里三四次,感觉不是太好,也用过他们用环氧乙烷活化的介质,结果我想连接的配基什么也接不上,不知道是我连接的条件不对,还是哪里出了问题,不过你可以试试。
我用过国产的介质,总觉得还是比不了安玛西亚的介质。
你还没说这是什么介质呢?凝胶过滤吗?

作者: xueyouzhang    时间: 2014-6-27 15:49

是呀,就是要用凝胶过滤,我也是担心国产介质的质量,但是考虑价钱嘛,只有试试了。不接什么配基,就是简单的用凝胶过滤问题应该不大吧
作者: mamamiya    时间: 2014-6-27 15:50


凝胶过滤可能也会有问题的。
你想想凝胶过滤是利用凝胶的孔径大小来分离蛋白质的。如果胶的做的不合格,或者没有经过严格的检测,对你的实验来说不算是个好的选择。
但是我觉得为了省钱,还是可以试用。
说不定国产介质也是个很好的选择。只有用过才知道。

作者: c86v    时间: 2014-6-27 15:50


琼脂糖凝胶的孔径是有琼脂糖凝胶的浓度决定的,所以通常如果严格用进口低电渗的琼脂糖来应该差不多,所以没什么问题,当然你需要的话可以分装的,国内也有卖的,活化的填料很活泼的最好是干粉的,如果是液体中保存很难保证偶联的活性,填料厂家关键除提供好的产品,同时还需要提供专业的售前和售后的服务.所以一分价钱一分货.有的太便宜未必就好用了.

作者: xueyouzhang    时间: 2014-6-27 15:51

今天在实验室翻到一个Butyl sepharose 4FF的柱子,是安玛西亚的耶。不知道这个Butyl基团起什么作用,我如果拿这个介质用作凝胶介质,不知道效果会怎么样。
作者: c86v    时间: 2014-6-27 15:51

不行,因为它是疏水色谱填料,会有一些非特异吸附的,当然你可以试试,如果你加0.25M左右的盐可以避免这样的离子作用,但是如果你的蛋白疏水性强也可以被吸附,你可以先试试.
作者: mamamiya    时间: 2014-6-27 15:52



QUOTE:
原帖由 xueyouzhang 于 2014-6-27 15:51 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
今天在实验室翻到一个Butyl sepharose 4FF的柱子,是安玛西亚的耶。不知道这个Butyl基团起什么作用,我如果拿这个介质用作凝胶介质,不知道效果会怎么样。 ...

这个是疏水介质分离原理完全不一样。
是利用蛋白的疏水性质来分离的,上样的盐浓度很高,有些是用3M硫酸铵,甚至更高,用低盐洗脱。
如果你的分离方法是成熟的,那就不要改,如果正在摸索中,那可以试用摸摸条件,说不定也能用。具体看你的样品中杂蛋白与目的蛋白的疏水性质,如果相差很近就不能用了。

作者: xueyouzhang    时间: 2014-6-27 15:52


这样子呀,那还是不麻烦这个了,就像用个简单的原理,主要也不是做这个。感谢各位热心的建议。
我想还是先买点国产的介质小试一下,如果有苗头的话再考虑买进口的吧,去跟老板要钱实在不是件轻松的事情呀。

作者: xueyouzhang    时间: 2014-6-27 15:53

得研究一下疏水了,概念很模糊。是不是说如果我的样品疏水性很差的话,我直接用低盐上样和洗脱就可以不受疏水作用的影响,只起到分子筛的作用呢?
试试看也是很有趣的呀

作者: taoshengyijiu    时间: 2014-6-27 15:53


进口的丁基琼脂糖凝胶还有部分离子作用的,所以没你想那样简单,所以要试的话也需要0.25M左右的盐才能避免这样的作用力.





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