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标题: 【求助】PMSF贮存问题 [打印本页]

作者: 红袖添香 时间: 2014-6-27 16:02 标题: 【求助】PMSF贮存问题

PMSF ，配细胞裂解液用，一般都是先用现加到裂解液里面。我买的是2mg粉状的PMSF，要把它配成溶液的贮存在4度的话，用什么溶解呀？（在水溶液中失活）

作者: 49888 时间: 2014-6-27 16:02

PMSF是用异丙醇来配制的，你可以把它先配成100ug/ml，在4度冰箱里储存，用的时候释到2ug/ml的工作浓度使用就可以了，记住PMSF有剧毒，配制时一定要在通风橱里操作！

作者: wu11998866 时间: 2014-6-27 16:02

我也要配PMSF，用于裂解细胞，请问是不是不需要无菌操作？存放前需要过滤灭菌吗？

作者: yonger 时间: 2014-6-27 16:03

异丙醇来配制的100XPMSF,室温避光保存.

作者: DNA 时间: 2014-6-27 16:03

我的100倍PMSF储备液是放在-20℃中避光保存，用前在4℃中先溶解。

作者: vivian4123 时间: 2014-6-27 16:03

pmsf工作浓度应该是17-174微g/ml，也就是要配17.4mg/ml
以上配100微的应该不对吧

作者: jkobn 时间: 2014-6-27 16:04

1.配制方法 :用异丙醇溶解PMSF成1.74mg/ml（10mmol/L），分装成小份贮存于-20℃。如有必要可配成浓度高达17.4mg/ml的贮存液（100mmol/L）。我使用的终浓度为2mM.(200µl Lysis Buffer add 4µl (PMSF: 100mM/l))
2.PMSF是剧毒试剂,能严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤，吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。一旦眼睛或皮肤接触了PMSF，应立即用大量水冲洗之。凡被PMSF污染的衣物应予丢弃。PMSF在水溶液中不稳定。应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快，且25℃的失活速率高于4℃。pH值为8.0时，20μmmol/l PMSF水溶液的半寿期大约为85min，这表明将PMSF溶液调节为碱性（pH>8.6）并在室温放置数小时后，可安全地予以丢弃。
3.PMSF主要是含半胱氨酸,丝氨酸的蛋白的抑制剂,楼主可以有选择,有目的的使用.另外在DTT,2-mercaptoethanol存在的情况吓会失效!
楼主小心,楼主好运!

作者: qqq111 时间: 2014-6-27 16:04

本相说点但是blue_protein 已经很全面了,

作者: plaa 时间: 2014-6-27 16:04

PMSF用有机溶剂在-20℃和4℃的状态也没什么大的区别吧!??好象不会结冰吧?!!配的时候就是晶体不大容易溶解倒是的.

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