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标题: 【求助】安捷伦1200，在203nm处，为什么无吸收？ [打印本页]

作者: xuuuu 时间: 2014-7-30 17:13 标题: 【求助】安捷伦1200，在203nm处，为什么无吸收？

安捷伦1200，在203nm处，为什么无吸收？表样和样品都跑不出图形？

作者: 小野花 时间: 2014-7-30 17:13

你用什么做流动相啊？

作者: nn255 时间: 2014-7-30 17:13

你样品在203有吸收吗？有没有看一下你样品的DAD吸收图谱。如果是甲醇流动相的话，甲醇末端吸收205nm。会干扰你样品。

作者: xuuuu 时间: 2014-7-30 17:16

是用甲醇的，可是2010版第一步药典规定做人参，就是用甲醇溶解，203nm处吸收的。我是做药材进厂检测的，请问我该如何改进方法呢？

作者: xuuuu 时间: 2014-7-30 17:17

流动相是用甲醇的

作者: mamamiya 时间: 2014-7-30 17:17

你先排除一下，是不是你操作或者仪器硬件问题，比如检测器有没有连接好或者进样有没有问题。如果你仪器可以有DAD的话，很容易就可以看见你的样品在哪个波长下吸收好了。实在没有吸收的话，只能考虑更换波长了。既然药典方法，那么我觉得方法应该不会有大问题。你是检测人参中某种物质的含量来确定药材的质量优劣的吧？能具体说一下条件不？

作者: wmp1234 时间: 2014-7-30 17:18

http://www.sepu.net/bbs/index.asp?boardid=176&TopicMode=0&List_Type=&Page=3

作者: xuuuu 时间: 2014-7-30 17:18

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为203nm。理论板数按人参皂苷Rg1，峰计算应不低于6000。
时间(分钟) 流动相A(％) 流动相B(％)
0~35          19          81
35~55    19-29    81-71
55~70       29          71
70~100    29-40    7l-60
测定人参中Rb1，Rg1，Re的含量的

作者: yysr238 时间: 2014-7-30 17:19

这个流动相是乙腈啊。。。。。。

作者: gogo 时间: 2014-7-30 17:22

方法依据：中国药典一部
色谱柱：JADE-PAKTM ODS 5um 250×4.6mm(货号：0336-2546)

流速：1.0ml/min
波长：203nm
柱温：室温
进样量：20ul
样品制备：按中国药典方法

供参考

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http://bbs.antpedia.com/attachment.php?aid=26088

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http://bbs.antpedia.com/attachment.php?aid=26089

作者: gogo 时间: 2014-7-30 17:22

供参考，药典的方法是乙腈-水梯度。你那个甲醇怎么来的。。。。。

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http://bbs.antpedia.com/attachment.php?aid=26090

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http://bbs.antpedia.com/attachment.php?aid=26091

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http://bbs.antpedia.com/attachment.php?aid=26092

作者: wu11998866 时间: 2014-7-30 17:23

我觉得应该是你的操作或者仪器问题了。逐一好好排查一下样品配制及进样还有检测器吧。乙腈203不会影响检测的，况且楼上的把图都给你了，方法应该没问题。

作者: xuuuu 时间: 2014-7-30 17:23

溶剂用的是甲醇，不好意思，没有说清楚。流动相是乙腈，溶剂是甲醇

作者: zsxan1990 时间: 2014-7-30 17:23

检查一下你的具体操作，乙腈-水走梯度，即使使用甲醇溶解样品，也应该没问题

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