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标题: 【求助】峰宽如何缩小，怎样与杂峰分离呢？ [打印本页]

作者: feiya 时间: 2014-7-30 17:34 标题: 【求助】峰宽如何缩小，怎样与杂峰分离呢？

如附件图片所示，我要的目标峰是标品中的保留时间为6.7左右的这个峰，而我样品1中的峰算是分开了但样品2的峰就分不开。求高人指教下我如何将我样品2中我的目标峰与它前后的两个峰分开？有什么方式可以让我的峰型变尖？

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作者: gogo 时间: 2014-7-30 17:35

具体是什么样品，具体分析条件如何？

作者: feiya 时间: 2014-7-30 17:35

样品是甜乳清粉和玉米肽的混合物，要分离一种游离的氨基酸。样品经亚铁氰化钾和乙酸锌前处理后，分析条件是：C18柱，柱温：30℃。流速：1ml/min.
流动相是：A泵是甲醇，45%. B泵：50mM乙酸钠：四氢呋喃=50:1 ，55%。流动相pH为6.60

作者: sunnyB 时间: 2014-7-30 17:36

楼主能不能把色谱条件和分离的物质描述一下，这样才好分析嘛。
从你的图上来看，想要分离度和峰型一起变好的话，很困难

作者: jkobn 时间: 2014-7-30 17:36

减少进样量试试

作者: xue258 时间: 2014-7-30 17:46

先说一下具体的色谱方法，可以考虑样品的溶解溶剂，柱子，流动相比例等、、、

作者: feiya 时间: 2014-7-30 17:46

我的样品是乳清粉和玉米肽的混合物，我要检测的物质是一种游离的氨基酸。我将样品经过亚铁氰化钾和乙酸锌前处理后，色谱条件是：C18的柱子，柱温30℃，流速1ml/min.
流动相是： A泵：甲醇，45% B泵： 50mM乙酸钠：四氢呋喃=50:1 ，55% 流动相pH为6.60

作者: feiya 时间: 2014-7-30 17:47

我的样品是乳清粉和玉米肽的混合物。我要检测的是一种游离氨基酸，我将样品用亚铁氰化钾和乙酸锌处理后，分析条件是：C18柱子，柱温30℃，流速1ml/min。流动相是：A泵（甲醇45%）B泵（50mM乙酸钠：四氢呋喃=50:1，55%）流动相pH为6.60，柱前衍生。

作者: zhenxin 时间: 2014-7-30 17:47

是要用液相的方法纯化制备吗？条件换成梯度的吧。

作者: moonlight45 时间: 2014-7-30 17:48

每个峰宽都偏大，进样量太大，柱子过载有可能，先试试减少进样量。
造成峰宽的原因有：
1、流动相组成变化
2、流动相流速太低
3、检测器设定不准确
4、柱外效应
5、缓冲液浓度太低
6、保护柱污染或失效
7、色谱柱污染或失效，塔板数较低
8、柱温过低
等等，希望对你有帮助！祝实验顺利

作者: zranqi_1 时间: 2014-7-30 17:48

干扰太大，最好改进前处理方法。目标物在这个浓度干扰比较大。

作者: tuuu2 时间: 2014-7-30 17:51

请问~检测器是UV还是PDA

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