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标题: 【求助】做人参皂苷的分离好伤色谱柱啊？ [打印本页]

作者: 牛顿 时间: 2014-12-2 17:17 标题: 【求助】做人参皂苷的分离好伤色谱柱啊？

最近在用HPLC分离人参中的皂苷，摸索合适的流动相，用的流动相一直是乙腈和水，梯度洗脱。发现人参皂苷好伤柱子，用了一段时间后柱子柱效直线下降，之前峰都分得很好，到后来一模一样的条件，峰分不开了，峰面积也减少了。不知是什么原因，有什么解决办法么？

作者: misswu61 时间: 2014-12-2 17:17

每走完一针样品，要用高比例的有机相冲洗一下，都走完样品后要要好好洗柱

作者: zwsyrt 时间: 2014-12-2 17:17

液相分皂苷，真土豪

作者: summerxx 时间: 2014-12-2 17:18

你流动相或者样品不干净吧,样品做液相前需要先过ODS,就我所知皂苷是最适合用ODS分离而且对柱子损耗最小的

作者: xiaoxiaoniao 时间: 2014-12-2 17:18

加预柱，多洗洗柱子

作者: 牛顿 时间: 2014-12-2 17:18

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每走完一针样品，要用高比例的有机相冲洗一下，都走完样品后要要好好洗柱

我是这么做的，进完样品后都要冲洗近一个小时的柱子，可貌似没啥用啊，柱效还是下降好快

作者: 牛顿 时间: 2014-12-2 17:18

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液相分皂苷，真土豪

为何这么说？

作者: 牛顿 时间: 2014-12-2 17:19

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你流动相或者样品不干净吧,样品做液相前需要先过ODS,就我所知皂苷是最适合用ODS分离而且对柱子损耗最小的

我用的就是C18的柱子呀？

作者: 牛顿 时间: 2014-12-2 17:19

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原帖由 xiaoxiaoniao 于 2014-12-2 17:18 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
加预柱，多洗洗柱子

貌似没啥用

作者: shenkunjie 时间: 2014-12-2 17:19

这个应该不是皂苷的问题，正常使用应该不会导致柱效下降的 lz再考虑一下别的原因

作者: 牛顿 时间: 2014-12-2 17:20

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原帖由 shenkunjie 于 2014-12-2 17:19 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
这个应该不是皂苷的问题，正常使用应该不会导致柱效下降的 lz再考虑一下别的原因

我是新手，处于初学阶段，实在分析不出还有哪些原因了，你能给我分析一下么，非常感谢

作者: 30moonriver 时间: 2014-12-2 17:21

首先，皂苷类成分本身相应值较低，在液相中峰较为低矮，另外也容易产生拖尾现象，特别是遇到极性非常大的皂苷类成分，因此做制备对柱效要求是蛮高的；如果按照正常操作，对柱子的损害是不会很大的，比如进样前过开放ODS柱，过微孔滤膜等，最大限度除去易发生死吸附的成分，因此我怀疑楼主色谱柱出现这样的问题还是在样品处理环节上，另外长时间做制备，样品很有可能随着有机相挥发而出现部分析出，这时很有可能造成色谱柱堵塞，柱压快速升高；还有就是做完制备后的冲柱环节，需要长时间纯甲醇冲柱，30分钟左右吧，结合检测器观察是否还有杂质冲出来，另外不知道楼主的流动相里是否加酸了，如果有酸是不能即刻使用高浓度有机相冲的。

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