分析测试百科

标题: 【求助】多糖沉淀后，用95%乙醇和无水乙醇洗涤的... [打印本页]

作者: 大白菜 时间: 2014-12-3 17:38 标题: 【求助】多糖沉淀后，用95%乙醇和无水乙醇洗涤的...

看到很多关于多糖提取的文献，有一处我不大明白，就是，多糖在提取完后，用乙醇过夜沉淀，是什么原理？之后又用95%乙醇和无水乙醇及丙酮洗涤，每一次的洗涤的主要目的是什么？是除去什么成分吗？
另外，在提取之前，一般都用乙醇回流提取是除去哪些物质？

作者: ALALA 时间: 2014-12-3 17:39

作用是除去水分
你有没有发现刚沉出来的东西都是粘糊糊的等用95 无水丙酮（丙酮完了还有用乙醚洗涤的）洗完了好一点的能成粉末状至少不是黏黏的了

作者: seagate 时间: 2014-12-3 17:40

乙醇沉淀后，用无水乙醇、丙酮、乙醚进行洗涤的目的主要有二：其一，进一步除掉其他杂质，如色素、蛋白、低聚糖、氨基酸等，达到纯化的目的。其二，洗涤的过程也是脱水干燥的过程，所得多糖多呈粉末状，利于后续使用和保存。

作者: kuohao17 时间: 2014-12-3 17:40

95的醇就是沉多糖的啊，为什么提取完了还要再加？怕没沉淀完吗？

作者: 00无名指00 时间: 2014-12-3 17:40

水提醇沉法

作者: 大白菜 时间: 2014-12-3 17:41

QUOTE:

原帖由 kuohao17 于 2014-12-3 17:40 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
95的醇就是沉多糖的啊，为什么提取完了还要再加？怕没沉淀完吗？

很多资料上写再用95%乙醇，无水乙醇，丙酮洗涤，我就想问下是什么作用？

作者: 大白菜 时间: 2014-12-3 17:41

QUOTE:

原帖由 ALALA 于 2014-12-3 17:39 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
作用是除去水分
你有没有发现刚沉出来的东西都是粘糊糊的等用95 无水丙酮（丙酮完了还有用乙醚洗涤的）洗完了好一点的能成粉末状至少不是黏黏的了 ...

你说的有道理，那就是浓度越高越好了。谢谢了。可是如果在生产中，这个成本是不是太高了？

作者: october7 时间: 2014-12-3 17:42

用乙醇过夜沉淀，是为了使多糖沉淀出来
之后又用95%乙醇和无水乙醇及丙酮洗涤，每一次的洗涤是为了出去多余的水分和一些大分子的蛋白质等

作者: pulala 时间: 2014-12-3 17:42

这是实验室常用的做法，生产上用什么手段还真不知道
有没有搞生产的来说说生产中怎么做

作者: october7 时间: 2014-12-3 17:42

生产上也是如此，沉淀之后采用梯度脱水法进行脱水，并保持一定的时间，有利于干燥，避免形成结块，对后续工序造成影响，实验室如果在95%乙醇过程中用研钵研磨的化，得到的应该是粉状物

作者: IAM007 时间: 2014-12-3 17:43

洗掉料液中的粘性物质和多余的杂质

作者: leifengta 时间: 2014-12-3 17:43

95%乙醇过程是为了吸水干燥

作者: 00无名指00 时间: 2014-12-3 17:44

大多数人都是说除去水分，估计就是这样啦，学习了！

作者: 831226 时间: 2014-12-3 17:44

只知道水提醇沉，没做过

作者: 987789 时间: 2014-12-3 17:44

我们在实验室里都是直接用无水乙醇洗涤的，呵呵！

作者: IAM007 时间: 2014-12-3 17:45

我做过一种多糖，盐酸胍提取，丙酮分级沉淀，然后依次用95%乙醇、无水乙醇及丙酮洗涤脱水，最后低温烘干

作者: 966735obeng 时间: 2014-12-3 17:45

获得产品，除杂
生产上也是这么做的，醇沉，多次醇沉洗涤

作者: 00无名指00 时间: 2014-12-3 17:45

目的有二：沉淀完毕。在一个就是逐渐用能混溶的溶剂洗涤，等够加速干燥。

作者: 9900 时间: 2014-12-3 17:46

用95%乙醇先把多糖醇沉出来，但是沉淀是很黏的物料，加入无水乙醇或丙酮可以把黏性物料中的水分提取出来，这样物料就比较松散，然后低温真空干燥得到的产品基本是粉状的物料，而且物料容易干燥。

作者: jujuba 时间: 2014-12-3 17:46

是为了更好的除去杂质一些蛋白质类的大分子等等

作者: pou 时间: 2014-12-3 17:46

乙醇沉淀后，用无水乙醇、丙酮、乙醚进行洗涤的目的主要有二：其一，进一步除掉其他杂质，如色素、蛋白、低聚糖、氨基酸等，达到纯化的目的。其二，洗涤的过程也是脱水干燥的过程，所得多糖多呈粉末状，利于后续使用和保存。

作者: misswu61 时间: 2014-12-3 17:47

主要两个目的，脱水和洗除盐分

作者: youreyes 时间: 2014-12-3 17:47

初步醇沉的过程中有包裹小分子杂质，所以就用高浓度的醇或丙酮进行洗涤，脱水。
现在大生产因为醇沉成本太高很少用此方法进行多糖的分离和纯化，比较好的办法有膜超滤，以后很有优势的方法

作者: 7437654 时间: 2014-12-3 17:47

因为酸性粘多糖刚刚沉淀出来是粘糊糊的，说明里面还有很多分子携带着水，继续加乙醇丙酮就是去除多余的水。生产上也是这样做的，梯度脱水

作者: baidukk 时间: 2014-12-3 17:48

乙醇沉淀是利用大部分水溶性多糖不溶于乙醇的原理
根据不同的目的可以选择分级醇沉和完全醇沉

至于沉淀后加入无水乙醇或丙酮则是为了除去残留的水分
这样获得的多糖组分不至于呈现出粘糊糊的状态，也对后面的冻干等操作步骤带来方便

作者: 8princess8 时间: 2014-12-3 17:48

提取之前用乙醇处理，应该是脱脂吧。

作者: mamamiya 时间: 2014-12-3 17:48

开始提取之前用95%乙醇是脱脂，之后是让多糖沉淀出来，最后再用无水乙醇和丙酮洗涤是干燥，也可以脱脱色

作者: okhaha 时间: 2014-12-3 17:49

初步醇沉的过程中有包裹小分子杂质，所以就用高浓度的醇或丙酮进行洗涤，脱水。
现在大生产因为醇沉成本太高很少用此方法进行多糖的分离和纯化，比较好的办法有膜超滤，以后很有优势的方法

=============================================================

您好你用过膜超滤吗听说不是很好用老是堵还有好的方法吗听说超滤浓缩挺好

作者: 00无名指00 时间: 2014-12-3 17:49

毕业课题做的也是这个，当时也挺迷惑的，那个95%的用来把糖提取出来，后面的是用来洗去杂质，当时师兄是这么解释的，我们就只用无水乙醇洗了洗提出来的多糖，应该还有脱色的作用

作者: 966735obeng 时间: 2014-12-3 17:50

出去杂质的

作者: loli 时间: 2014-12-3 17:50

水提醇沉法，要除去小分子化合物

作者: 9900 时间: 2014-12-3 17:50

初步醇沉的过程中有包裹小分子杂质，所以就用高浓度的醇或丙酮进行洗涤，脱水。
现在大生产因为醇沉成本太高很少用此方法进行多糖的分离和纯化，比较好的办法有膜超滤，以后很有优势的方法

=================================================================

都已经是沉淀包裹里面的小分子了
那再用乙醇和丙酮洗的话只能洗到初步沉淀的表面啊？？还是不能洗到内部？？怎么办

作者: daod 时间: 2014-12-3 17:51

多糖在提取完后，最好用冷乙醇加至终浓度为70%~80%过夜离心收集沉淀，目的是去除粗糖中的部分杂质成分，使之成为粗精糖。之后就直接用无水乙醇两次及丙酮洗涤三次，目的都是去除糖中的水分，这一步才到真正的粗糖了。这一步在车间里做要特别注意湿度的大小，丙酮含量等结果有影响，GMP时可能国家要求的一项。95%乙醇洗涤这一步没必要用的。

作者: pou 时间: 2014-12-3 17:51

楼上说的都很好，确实是为了梯度脱水的目的，同时还能达到脱除色素，小分子杂质等目的。

作者: mingming0638 时间: 2014-12-3 17:52

作用是除去水分
你有没有发现刚沉出来的东西都是粘糊糊的等用95 无水丙酮（丙酮完了还有用乙醚洗涤的）洗完了好一点的能成粉末状至少不是黏黏的了

=========================================================================

请问用无水乙醇，丙酮，乙醚洗涤的比例是多少啊？知道吗，谢谢了，我也看了好多都没说具体的量。

作者: koook5695 时间: 2014-12-3 17:52

乙醇沉淀后，用无水乙醇、丙酮、乙醚进行洗涤的目的主要有二：其一，进一步除掉其他杂质，如色素、蛋白、低聚糖、氨基酸等，达到纯化的目的。其二，洗涤的过程也是脱水干燥的过程，所得多糖多呈粉末状，利于后续使用 ...

================================

具体的要怎么洗涤啊？用什么试验装置啊？

作者: kswl870 时间: 2014-12-3 17:53

QUOTE:

原帖由 koook5695 于 2014-12-3 17:52 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
乙醇沉淀后，用无水乙醇、丙酮、乙醚进行洗涤的目的主要有二：其一，进一步除掉其他杂质，如色素、蛋白、低聚糖、氨基酸等，达到纯化的目的。其二，洗涤的过程也是脱水干燥的过程，所得多糖多呈粉末状，利于后续使用 ...

========== ...

最简单的可以用离心管振荡，离心收集沉淀，反复操作。如果样品量大的话可以在烧杯中搅拌，再离心收集沉淀，样品很多的话可以用漏斗过滤液可以。

欢迎光临分析测试百科 (http://bbs.antpedia.com/)