标题:
【求助】RAW264.7细胞的培养问题
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作者:
大大大山楂
时间:
2014-12-4 17:25
标题:
【求助】RAW264.7细胞的培养问题
该细胞我用的是DMEM高糖培养基,10%FBS,1%P/S。培养情况不是很好,细胞膜向外生出很多角,希望培养过此细胞的人可以一起交流。另外,此细胞贴壁很紧,不知各位用胰酶消化几分钟?
作者:
49888
时间:
2014-12-4 17:27
RAW264.7细胞为小鼠单核巨噬细胞白血病细胞
培养基:1640+10%FBS
消化条件: 预冷PBS浸泡5-10Min
细胞正常形态为圆形,贴壁生长,生长速度较快,细胞难消化,消化时用预冷的PBS淋洗,然后浸泡5min,让后用枪轻轻吹起吹散收集离心,这个过程很关键,如果没有消化到位就吹打或消化过久,细胞次日贴壁就会分化,分化之后的形态是细胞两端长出尖尖的触角,细胞不再圆形贴壁,而是平铺向四周扩散生长。
所以你换培养基试试看,我养的挺好的!
作者:
大大大山楂
时间:
2014-12-4 17:27
QUOTE:
原帖由
49888
于 2014-12-4 17:27 发表
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')
RAW264.7细胞为小鼠单核巨噬细胞白血病细胞
培养基:1640+10%FBS
消化条件: 预冷PBS浸泡5-10Min
细胞正常形态为圆形,贴壁生长,生长速度较快,细胞难消化,消化时用预冷的PBS淋洗,然后浸泡5min,让后用枪轻轻吹起吹散收集 ...
呵呵。你好。我没有养过这个细胞但是我参照ATCC细胞库中的细胞形态,图我放在后面了,看到它低密度中也有很多有触角而不是圆形的细胞存在,我有点疑惑这个是不是你说的分化了的细胞?高密度看起来是圆形的。
图片附件:
RAW-264.7.jpg
(2014-12-4 17:27, 112.42 KB) / 该附件被下载次数 43
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作者:
49888
时间:
2014-12-4 17:28
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原帖由
大大大山楂
于 2014-12-4 17:27 发表
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呵呵。你好。我没有养过这个细胞但是我参照ATCC细胞库中的细胞形态,图我放在后面了,看到它低密度中也有很多有触角而不是圆形的细胞存在,我有点疑惑这个是不是你说的分化了的细胞?高密度看起来是圆形的。 ...
是的
作者:
huifeng0516
时间:
2014-12-4 17:28
这种情况我们也遇到,所以传代处理要注意啦!
作者:
zhenxin
时间:
2014-12-4 17:28
我也是用DMEM高糖的培养基,细胞也是养养就分化了,请问怎么好啊?望大家指教我一下!
作者:
mamamiya
时间:
2014-12-4 17:29
我刚刚买了RAW264.7,呈圆形,用10%FBS,高糖DMEM培养,一定要高密度传代,胰酶消化后,PBS清洗两遍,轻轻吹打就可以了
作者:
了了
时间:
2014-12-4 17:29
raw264.7好像transfer到10次以上就分化的越来越多~分化程度50%以上就最好别再用了
作者:
xue258
时间:
2014-12-4 17:29
我也养了这个细胞,但是形态看上去是这样的,就是贴避越来越不牢固了。
作者:
join
时间:
2014-12-4 17:29
请问RAW264.7的大小
作者:
dodoit
时间:
2014-12-4 17:30
培养基:1640+10%FBS
消化条件: 预冷PBS浸泡5-10Min
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能向您请教一下这个细胞的培养吗
作者:
wiwi
时间:
2014-12-4 17:30
我们也用RAW264.7细胞,昨天刚复苏的,还没有贴壁,一般复苏多久后回贴壁呢?请大家提点建议,急着养细胞做后续试验,谢谢了
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