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标题: 【求助】请教做过凝胶分离的同学，谢谢 [打印本页]

作者: finger 时间: 2015-1-17 22:28 标题: 【求助】请教做过凝胶分离的同学，谢谢

在优化凝胶分离条件，对于在多个馏分中要分开的两个化合物用什么方式表达其分离度比较好呢？

作者: standbyme 时间: 2015-1-17 22:28

大家的回复都有道理，但是可能大家专业不同基本方法不同。我看楼主是微生物生理与生物化学专业，那我们的专业基本是相同的，说一下我的看法。
首先楼主你提供的信息太少了，很难给你一个很好的解决方案。
然后做分离纯化目的是要分开，实验前期分没分开一眼就看出来了，至于想用什么指标来表征分离度，到分离开之后再找不迟。
最后最分离纯化可以选用的方法很多，很多时候是两三种方法联用的，很少有物质用单一方法可以达到很好的分离效果。
需要的话你可以发站内信联系，一起好好分析一下~

作者: jiushikeshui371 时间: 2015-1-17 22:43

应该是两种馏分的分子量大小差别吧，差别越大，分离度越大。

作者: finger 时间: 2015-1-17 22:43

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原帖由 jiushikeshui371 于 2015-1-17 22:43 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
应该是两种馏分的分子量大小差别吧，差别越大，分离度越大。

可能是我表达的不太清楚，我们这两个组分在多个馏分中都存在，用什么统计方法表示两个组分的分离度比较好呢？

作者: remonte 时间: 2015-1-17 23:00

你是使用凝胶后，然后在多个接的馏分中都检测到这两个化合物？是这个意思？

作者: finger 时间: 2015-1-17 23:01

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你是使用凝胶后，然后在多个接的馏分中都检测到这两个化合物？是这个意思？

恩，是的，用什么方法比较哪个条件分离度略好一些，头疼

作者: remonte 时间: 2015-1-17 23:01

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原帖由 finger 于 2015-1-17 23:01 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

恩，是的，用什么方法比较哪个条件分离度略好一些，头疼

首先看你的分离目的，如果单纯的是分离化合物，说明你这个型号的凝胶，或者说这个洗脱系统，不适合你的这两个化合物的分离，这样可以选择你的柱材料的。如果是必须使用凝胶的话，那么凝胶的型号，洗脱系统，你都要摸索下！一般做植化分离的，实验室常用的凝胶是sepdex LH-20，洗脱系统有：甲醇，甲醇-二氯甲烷，甲醇-水等。

作者: wanglaoshi 时间: 2015-1-17 23:02

分馏目标成分与其相邻的分馏成分之间的分离度比较准确。

作者: wanglaoshi 时间: 2015-1-17 23:02

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原帖由 finger 于 2015-1-17 22:43 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

可能是我表达的不太清楚，我们这两个组分在多个馏分中都存在，用什么统计方法表示两个组分的分离度比较好呢？

多个馏分中都存在，说明这个分离体系行。如果要知道这两组分在这个分离体系的分离度，前提是这两组分得分开。试试其他分离体系怎样，好像可以用凝胶板分离显色，摸索下分离体系。

作者: wanglaoshi 时间: 2015-1-17 23:03

R=2(tR2-tR1)/(w1+w2) 现在你能知道（w1+w2）但不能确定各组分是否呈高斯分布，(tR2-tR1)就没法确定了，只是选个条件的话可以用W12/(W1+W2)来表示，这个数值越小表示分离度越好。不知道我理解的你的提问对不对。

作者: tewank 时间: 2015-1-17 23:03

或者你减少上样量，增加柱长或调低流速来争取分开，再算分离度

作者: damingxia0904 时间: 2015-1-17 23:04

大家的回复都有道理，但是可能大家专业不同基本方法不同。我看楼主是微生物生理与生物化学专业，那我们的专业基本是相同的，说一下我的看法。
首先楼主你提供的信息太少了，很难给你一个很好的解决方案。
然后做分离纯化目的是要分开，实验前期分没分开一眼就看出来了，至于想用什么指标来表征分离度，到分离开之后再找不迟。
最后最分离纯化可以选用的方法很多，很多时候是两三种方法联用的，很少有物质用单一方法可以达到很好的分离效果。
需要的话你可以发站内信联系，一起好好分析一下~

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