分析测试百科

标题: 【求助】多糖sevage法除蛋白后252仍有吸收 [打印本页]

作者: mod=8048 时间: 2015-1-17 23:56 标题: 【求助】多糖sevage法除蛋白后252仍有吸收

我在做植物多糖除蛋白，sevage法两项交界处已经看不到变性蛋白了，可是UV扫描时除了200左右的糖峰，在252左右还有一个小一些的峰，两峰比值0.3，我的糖溶液有颜色。
请问大家252这个峰可能是什么呢？蛋白？核酸？还是色素？有什么方法可以出去呢？谢谢啦

作者: uaubc 时间: 2015-1-17 23:56

多除几次蛋白

作者: mod=8048 时间: 2015-1-17 23:57

QUOTE:

原帖由 uaubc 于 2015-1-17 23:56 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
多除几次蛋白

谢谢。
不过sevage已经没现象了，用活性炭脱了一下色，两峰比例有所下降，可能是色素。

作者: sunbent 时间: 2015-1-17 23:57

sevag法的优势在于除多糖比较柔和，不会使多糖降解，
sevag法脱蛋白还会有蛋白剩余，多几次即可
多糖的色素分为两类：与多糖结合的结合型色素得用离子胶束除去，用活性碳除不了，但也要根据实际情况而定

作者: mod=8048 时间: 2015-1-17 23:57

QUOTE:

原帖由 sunbent 于 2015-1-17 23:57 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
sevag法的优势在于除多糖比较柔和，不会使多糖降解，
sevag法脱蛋白还会有蛋白剩余，多几次即可
多糖的色素分为两类：与多糖结合的结合型色素得用离子胶束除去，用活性碳除不了，但也要根据实际情况而定 ...

如果多除很多遍，sevag最终能够除去所有蛋白吗？包括结合蛋白
下面做的一种动物多糖，蛋白需要除的很干净，所以想先用蛋白酶酶解一下，能帮我推荐几种蛋白酶吗？希望尽可能彻底的酶解蛋白
非常感谢

作者: ROSE李 时间: 2015-1-17 23:58

我也是用sevage法除蛋白的，然后用双氧水法脱色，在透析，能得到纯度比较高的多糖

作者: ROSE李 时间: 2015-1-17 23:58

我也是用sevage法除蛋白的除了7-8次，然后用双氧水法脱色，在透析，能得到纯度比较高的多糖

作者: veiwu 时间: 2015-1-17 23:59

谢谢。
不过sevage已经没现象了，用活性炭脱了一下色，两峰比例有所下降，可能是色素。

===============================================================================================

不一定的，因为活性炭吸附的东西比较多，可能只是吸附走了一些你要得东西，并不定是色素的。而且用活性炭，多糖损失比较大。

作者: 8s5g 时间: 2015-1-17 23:59

我也是用sevage法除蛋白的除了7-8次，然后用双氧水法脱色，在透析，能得到纯度比较高的多糖

===========================================================================================================

请问你在用Sevage法除蛋白时，振摇后会不会出现乳化？我大概100ml多糖也加入Sevage试剂后在分液漏斗中振摇后溶液全部变成了白色乳状，而且只能用离心才能使他们分为两层，下层就全部是白白的东西根本看不见大家所说的中间那层，我想知道变性蛋白到底是什么状态的？

作者: 101010 时间: 2015-1-18 00:00

我也是用sevage法除蛋白的，然后用双氧水法脱色，在透析，能得到纯度比较高的多糖

===================================

双氧水脱色怎样的条件啊你，不怕多糖降解？

作者: 百分比 时间: 2015-1-18 00:06

可以尝试下木瓜蛋白酶这个中性的蛋白酶~最好根据你的多糖的提取方式来选择相应的蛋白酶来除蛋白

欢迎光临分析测试百科 (http://bbs.antpedia.com/)