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标题: 求助关于保健食品中总黄酮的测定 [打印本页]

作者: poppyzl 时间: 2010-12-20 15:48 标题: 求助关于保健食品中总黄酮的测定

要求用保健食品技术规范2003版上的方法，但是，实验室不同的人，做出来的结果相差很大，想请教一下用这个方法做过的前辈，实验中关键点在哪里，需要控制哪些因素，比如聚酰胺的是哪种，层析柱是哪种，等等，先谢谢了！

作者: unknow 时间: 2010-12-20 17:12 标题: 回复 #1 poppyzl 的帖子

我不知道规范上用的方法是什么，但既然是人不同差别就大，说明注意点应放在人的操作这块，让操作者互相交流一下操作细节也许是解决之道。
至于材料的选择，可以通过做回收率来甄别。

作者: nanopony 时间: 2010-12-20 19:58

楼主可以把规范内容贴出来吗？
使用液相检测的吗？

作者: 命运--ses 时间: 2010-12-20 19:58

结果相差很大的话肯定是操作上有很大区别。

你可以让第三个人或者那俩人都再做一次，仔细观察对比。

作者: bing0421gs 时间: 2010-12-20 19:59

操作手法是不是统一，最好大家在一起讨论，看看相互有什么区别，这样比较容易找到原因

作者: yexuqing 时间: 2010-12-20 19:59

先考查一下自己的重复性，然后在互相监督下检测，再对比，每一个步骤都要保证一样。

作者: popshengu 时间: 2010-12-20 19:59

在自动进样的前提下,个人认为手法(前处理)上肯定有不同的地方!

作者: wyznanhang 时间: 2010-12-20 20:00

层析柱聚酰胺用得较多

作者: sacred 时间: 2010-12-21 11:05

QUOTE:

原帖由 poppyzl 于 2010-12-20 15:48 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
要求用保健食品技术规范2003版上的方法，但是，实验室不同的人，做出来的结果相差很大，想请教一下用这个方法做过的前辈，实验中关键点在哪里，需要控制哪些因素，比如聚酰胺的是哪种，层析柱是哪种，等等，先谢谢了！ ...

最好一个一个的排除啊

如果自己一个人重复性好的话，那就是方法没有统一

作者: iTIANMING 时间: 2010-12-21 11:05

不是说用紫外分光光度法测总黄酮有干扰吗

作者: wangzhicui 时间: 2010-12-21 11:05

可以计算出Q值啊,看看结果是否可信

作者: poppyzl 时间: 2010-12-21 12:56

保健食品中总黄酮的测定方法（保健食品技术规范2003版）如下
1试剂
1.1聚酰胺粉。
1.2芦丁标准溶液：称取5.0g芦丁，加甲醇溶解并定容至100mL，即得50ug/ml。
1.3乙醇：分析纯。
1.4甲醇：分析纯。
2 分析步骤 ,
2.1 试样处理：称取一定量的试样，加乙醇定容至25ml，摇匀后，超声提取20min，放置，吸取上清液1.0ml，于蒸发皿中，加1g聚酰胺粉吸附，于水浴上挥去乙醇，然后转放层析柱，先用20ml苯洗，苯液弃去，然后用甲醇洗脱黄酮，定容至25ml，此液于波长360nm测定吸收值，同时以芦丁为标准品，测定标准曲线，求回归方程，计算试样中总黄酮的含量。
2.2 芦丁标准曲线
吸取芦丁标准溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml于10ml比色管中，加甲醇至刻度，摇匀，于波长360nm比色，求回归方程，计算试样中总黄酮的含量。
3计算
公式略

作者: poppyzl 时间: 2010-12-21 13:06

谢谢前面各位的宝贵意见
该方法我已经帖出来，请各位高手看看
我们把不同的人做的过程进行了比较，发现聚酰胺用的不同，现在我怀疑是聚酰胺种类的问题，造成结果不同，但是，两种聚酰胺做出来的结果都不行，请教各位，聚酰胺种类对结果影响是否如此大，或者有其他的控制点我们没有发现？现在我还没有考虑到方法的重复性好与坏，目前考虑的是方法是否可行，操作的哪个点对结果影响较大，因为回收做了，结果也不好

作者: haohaorenjia 时间: 2010-12-27 13:55

那同一个人重复的结果怎么样呢？

作者: mingdongmmw 时间: 2010-12-29 17:35

个人感觉还是在上住和洗脱那，上住是否完全？洗脱是否干净，一定要控制流速

作者: 感悟人生 时间: 2010-12-29 17:36

应该是前处理的手法或是同一手法处理的时间长短不一样吧!

作者: Geochimica 时间: 2010-12-29 17:36

可能是该方法本身就不完善吧
存在一些不稳定因素
重现性不是很好！

作者: gitde 时间: 2010-12-29 17:36

感觉总黄酮的测定还是比较稳的呀，可能是因为前处理要经过上柱、显色的过程，不同的人，可能处理的精细度不同，导致结果会有差别

作者: jeirf3uwd 时间: 2011-1-3 09:42

总黄酮的测定还是比较稳的呀，可能是因为前处理要经过上柱、显色的过程，不同的人，可能处理的精细度不同，导致结果会有差别.

作者: jianghai 时间: 2011-1-3 09:42

QUOTE:

原帖由 poppyzl 于 2010-12-21 12:56 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
保健食品中总黄酮的测定方法（保健食品技术规范2003版）如下
1试剂
1.1聚酰胺粉。
1.2芦丁标准溶液：称取5.0g芦丁，加甲醇溶解并定容至100mL，即得50ug/ml。
1.3乙醇：分析纯。
1.4甲醇：分析纯。
2 分析步骤 ,
2.1 试样处理 ...

从方法来看，主要是提取的效益和过柱的情况很关键。

作者: lclong0213ng 时间: 2011-1-3 09:43

你的层析柱是怎么装的，装了多少？如果装的太多，还按上面的溶剂量来洗的话有可能洗不彻底的，

作者: xiaoweiwe121 时间: 2011-1-3 09:43

结果相差很大，说明你的方法有问题

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