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标题: 混标样品中有一个物质突然在色谱图上出现两条峰 [打印本页]

作者: sugar-tang 时间: 2011-1-3 17:36 标题: 混标样品中有一个物质突然在色谱图上出现两条峰

各位大侠，我的混标样品中有一个物质突然在色谱图上出现两条峰，上次做还好好的，不知是什么原因，因为柱温箱坏了，温度很低，会是低温下同分异构体的分离造成的？
我一直用PH=3的甲酸水和乙腈梯度洗脱，这个PH是在柱子承受范围内的，可是[长期用是否对柱子不好？应该怎么调整才更好些呢？
下面是我前一次做的7种混标的标准品的图，出峰时间延后了一分多钟。其中的第一个峰是这次有问题的峰。

[ 本帖最后由 sugar-tang 于 2011-1-4 10:38 编辑 ]

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作者: utek 时间: 2011-1-3 22:38

能把上次的图谱发一个上来对比一下吗，混标溶液是新配制的吗？

作者: 绿茵ssein 时间: 2011-1-3 22:38

应该温度没这么大的影响

作者: feiteng666 时间: 2011-1-3 22:39

QUOTE:

原帖由 sugar-tang 于 2011-1-3 17:36 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
各位大侠，我的混标样品中有一个物质突然在色谱图上出现两条峰，上次做还好好的，不知是什么原因，因为柱温箱坏了，温度很低，会是低温下同分异构体的分离造成的吗？

6828 ...

您分析什么样品呢？正常的工作条件如何？其他的组分都正常么？如果其他的组分都正常，可能不是柱子问题。

作者: feiteng666 时间: 2011-1-3 22:39

QUOTE:

原帖由 绿茵ssein 于 2011-1-3 22:38 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
应该温度没这么大的影响

关键要看分析什么物质。

作者: fence-straddler 时间: 2011-1-4 07:34 标题: 回复 #1 sugar-tang 的帖子

先要排除标品是否变质，如果标品没问题，就是柱的问题了！有保护柱就换个保护柱。
你说的同分异构情况即使有，也应该是标准溶液变质造成的，纯的标准物如果存在除手性异构外的其他异构，是很容易被色谱柱分开的，无法作为标准。

作者: sugar-tang 时间: 2011-1-4 09:05 标题: 回复 #5 feiteng666 的帖子

我分析的是类黄酮，这个出现分叉的是野黄芩苷

作者: uytdo 时间: 2011-1-4 09:32

除了峰形还有什么参数变化？可能是柱子筛板堵了，好好冲冲看！

作者: haohaorenjia 时间: 2011-1-4 09:33

温度有可能影响，另外楼主说的温度很低是什么意思？非常低的话，比如<15度对仪器的会有不利影响的。

作者: sugar-tang 时间: 2011-1-4 10:40

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原帖由 haohaorenjia 于 2011-1-4 09:33 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
温度有可能影响，另外楼主说的温度很低是什么意思？非常低的话，比如

温度在15-17度之间，因为屋里的空调坏了，暖气也不热

作者: Bevis2004 时间: 2011-1-4 10:52

应该不是柱子问题，很可能就跟柱温低有关

作者: sseia42 时间: 2011-1-4 10:53

会不会本身就是两种物质啊

你恢复原柱温，然后加大的水的比例，再跑一个，看看是不是还是两个峰？

有可能以前分析条件下，两个峰没分开，柱温降低了，时间拖后反倒给分开了

作者: eedc-dcnge 时间: 2011-1-4 10:53

可能是温度引起的，我做过两样混合样品，柱温升高或降低5度，两峰出峰顺序交换。如柱温箱未修好，可控制一下室温试试，

你四峰出峰时间太快，方法耐用性不好，调一下吧，把时间延后至10分左右。效果会好一点

作者: sugar-tang 时间: 2011-1-4 11:10

QUOTE:

原帖由 sseia42 于 2011-1-4 10:53 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
会不会本身就是两种物质啊

你恢复原柱温，然后加大的水的比例，再跑一个，看看是不是还是两个峰？

有可能以前分析条件下，两个峰没分开，柱温降低了，时间拖后反倒给分开了 ...

这幅图是样品的图谱，两个最高的主峰保留时间特别相近，但是在另外一根柱子做液质时在这个位置只分出一条峰，并且质谱的数据也只有一个分子量，但是用现在的这根柱子一直是在这个位置上有两条峰，并且第二个峰无法对应出标准品，所以一直怀疑这是两个同分异构体

作者: sugar-tang 时间: 2011-1-4 12:05

QUOTE:

原帖由 eedc-dcnge 于 2011-1-4 10:53 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
可能是温度引起的，我做过两样混合样品，柱温升高或降低5度，两峰出峰顺序交换。如柱温箱未修好，可控制一下室温试试，

你四峰出峰时间太快，方法耐用性不好，调一下吧，把时间延后至10分左右。效果会好一点 ...

谢谢，我再调整一下。其实按照这个条件做，上一次的出峰时间在8分钟左右，可这次突然提前了，请问这可能是什么原因造成的呢，我的甲酸水和乙腈的初始比例是70：:30。

作者: emuchhh 时间: 2011-1-10 14:17

就是温度的原因

温度不同流动相粘滞性、分配系数什么的都会发生变化的

这都会导致出峰时间的变化

所以出现点儿状况也是难免的

尽快恢复柱温功能吧

作者: eedc-dcnge 时间: 2011-1-10 14:18 标题: 回复 #15 sugar-tang 的帖子

从第二张图看，柱子没问题，想办法回复柱温吧。你第一张图，出峰时间太早，三样保留时间相近，试验条件必然要求苛刻。建议降低乙腈比例试试。另pH值在范围内就行，使用后注意清洗就行。

作者: 心情se567 时间: 2011-1-10 14:19

单独进一针那个原先不分叉的色谱峰的对照品，看看图谱情况，或者换一根同样填料的色谱柱再次进混标看看。
同样的色谱条件，还是先不要用柱温箱。

作者: baohailin 时间: 2011-1-10 14:20

除了温度，别的条件有变化吗？

有柱子了，先换根柱子看看

作者: aa1380 时间: 2011-1-10 14:20

其他色谱峰没有异常，未必是色谱柱的问题。还需要考虑一下溶解样品的溶剂是不是过强。可能与温度有关系。

作者: Doctorcbw 时间: 2011-1-10 14:20

1.柱头塌陷或柱床运动
2.泵头滤芯部分堵塞
3.组分共流出

作者: wangwei8857 时间: 2011-1-10 14:20

我觉得有可能，如果该物质存在互变异构体的话，是有可能的。温度对互变异构体有很大影响。

作者: ztjnanning 时间: 2011-1-10 14:21

其他组分没有变化的话，那和色谱条件应该没有关系的，应该是物质本身的问题，同分异构或者温度影响其稳定性了

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