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标题: 【求助】制备色谱，平头峰，异常峰形计算分离度的疑问 [打印本页]

作者: mooon 时间: 2015-2-17 22:03 标题: 【求助】制备色谱，平头峰，异常峰形计算分离度的疑问

最近使用层析柱分离混糖的时候，流出曲线的峰形不是通常的“高斯”型的，而是有点平头峰，顶点位置确认的不是很准确，请问这种情况下怎么准确计算分离度？哪位大侠知道的，请帮帮忙！若峰形有点拖尾或前沿，使用通常的峰间距除以峰底宽的加和，是否还准确……

作者: birdfish 时间: 2015-2-17 22:04

制备色谱，一定要计算分离度吗？制备色谱出平头峰很正常，不影响分离效果就OK，个人感觉不必在这个问题上过于纠结

作者: abc816 时间: 2015-2-17 22:04

制备时出平头峰是比较正常的，是因为该组分的含量或者浓度在柱子中量大而集中，所以被检测器检测到一直处于最高吸收值处，就是平头的原因。至于后面计算分离度的问题，因为本人实验不涉及那方面，所以还请其他高手解答吧。祝你好运！

作者: mooon 时间: 2015-2-17 22:05

感谢你的回答。
其实我这个装置不是直接连接检测器来检测含量，而是在出口定时取样，然后用HPLC分析含量，绘制流出曲线的，所以不存在检测器处于最高吸收值的问题。所以才困惑......

作者: mooon 时间: 2015-2-17 22:05

QUOTE:

原帖由 birdfish 于 2015-2-17 22:04 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
制备色谱，一定要计算分离度吗？制备色谱出平头峰很正常，不影响分离效果就OK，个人感觉不必在这个问题上过于纠结

但是有的时候，譬如筛选树脂、筛选操作参数等，都要以分离度来作为判断的依据。这时候就是必须要计算了......但是平头峰的话，两峰间距，比较难以准确测量。分离效果的评价，不就是通过分离度吗

作者: u76mp 时间: 2015-2-17 22:05

一般不需要提供分离度数据。上样量的大小对制备色谱的峰形有极大影响，为了提高制备效率，加大上样量到柱子和分离的耐受限度是通常的做法，这时计算分离度无意义了。

作者: mooon 时间: 2015-2-17 22:06

QUOTE:

原帖由 u76mp 于 2015-2-17 22:05 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
一般不需要提供分离度数据。上样量的大小对制备色谱的峰形有极大影响，为了提高制备效率，加大上样量到柱子和分离的耐受限度是通常的做法，这时计算分离度无意义了。 ...

但是，在有些文献中，设计SMB之前，要进行树脂、操作参数的筛选，此时就是通过分离度来作为判断的依据的啊。我指的是针对混糖的分离。

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