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标题: 96孔板染色 [打印本页]

作者: zuzu123 时间: 2011-3-10 14:15 标题: 96孔板染色

我想用trypan blue 直接加入96孔板对细胞进行染色，分析死亡率。可是未经任何处理的细胞总是死亡率很高，请高手指教！
我的具体步骤是：完全吸出细胞培养液，加入40ul台盼蓝燃料，染色3-5分钟后完全吸出染料，镜下观察。会有达到30%的死亡率。用的培养基是商业化的不完全培养基，没孔中150ul！
请高手不吝赐教！感激不尽！

作者: aa1380 时间: 2011-3-10 17:06

是不是细胞接种密度太大或细胞的生长速度过快？

作者: zuzu123 时间: 2011-3-11 02:58

谢谢回复！我每孔只有10000个细胞，贴壁后换不完全培养基，培养5个小时候观测，应该不会密度太大或生长过快吧！

作者: chenxiaohu 时间: 2011-3-11 17:06

使用台盼蓝的方法不对吧。
确保是正常的工作浓度。

作者: zuzu123 时间: 2011-3-12 01:36

我试用的台盼蓝是0.4%。使用时直接将培养基吸干净，然后加入染料染3-5分钟，全部吸走染料后观察。这样有什么问题吗？

作者: ccf335 时间: 2011-3-12 12:12

是不是胎盘蓝用前没有稀释啊？

作者: zuzu123 时间: 2011-3-15 12:17

0.4% 的台盼蓝。根据大家的回复，我是不是可以说，通常情况下，我的操做是没有问题的，但是出于某种原因，我细胞的死亡率过高？

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