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标题: 分别该选什么试剂作标曲呢？ [打印本页]

作者: 兜兜 时间: 2015-3-27 23:07 标题: 分别该选什么试剂作标曲呢？

朋友们，若用分光光度法测蛋白标准品该怎样选呢？依据什么选呢？比如双缩脲法、考马斯亮蓝G250法、lorry法，分别该选什么试剂作标曲呢？这些方法能用同一个标品做标准曲线吗？真诚感谢您的不吝赐教，再次谢谢

作者: mr.henry 时间: 2015-3-27 23:07

凯氏定氮，我们这边就是用这个方法！~

作者: 娜爷~ 时间: 2015-3-27 23:10

福林酚法侧蛋白标准品用BSA 祝好运！

作者: 小书虫 时间: 2015-3-27 23:12

凯氏定氮啊··这个最好用了吧··

作者: outeer 时间: 2015-3-27 23:14

我用280nm和260nm比色法。推荐推荐~

作者: 冰@舟 时间: 2015-3-27 23:16

考马斯亮蓝法比较容易做祝你顺利哦~

作者: XXXX111 时间: 2015-3-27 23:18

如果可以确定样品里面不含有其他含N的物质（如三聚氰胺），可以用凯氏定氮法或有机元素分析仪之类的方法测定总氮量，然后确定总蛋白含量。
如果样品里面有其他含N的物质，可以用分光光度法（考马斯亮蓝法、lorry法、……）。具体选用哪种方法，也要看是否样品中有干扰这些方法的物质（能使显色剂显色，或干扰显色）。测定总蛋白含量，一般没有什么特殊的情况，用BSA做标准样品即可。

作者: 差不多先生 时间: 2015-3-27 23:20 标题: 回复 #5 outeer 的帖子

用分光光度法测，不同的方法可以都用BSA作标曲吗？

作者: 孤独的渔夫 时间: 2015-3-27 23:22

牛血清蛋白考马斯亮蓝

作者: 敬候佳音 时间: 2015-3-27 23:25

凯氏定氮法可以，考马斯亮蓝法，最简便

作者: 倾轻地 时间: 2015-3-27 23:28

买一台NanoDrop，1分钟内出结果（原量是分光光度法），准确又好用。强力推荐

作者: 雨儿 时间: 2015-3-27 23:31

BCA法微量凯氏定氮祝你好运！！！

作者: 落叶无声 时间: 2015-3-27 23:35

不同的分光光度法都可以用BSA做标准曲线，对普通蛋白质样品的定量偏差不会太大的。

作者: 我是夜猫子 时间: 2015-3-27 23:38

我现在用凯氏定氮，我们做水解度（酶解），但是时间比较长哦。一次只能做四个样品，一上午也就做一次。所以，如果时间上不允许的话，可以考虑其他办法。

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