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标题: 做完一种浓度而后做下一个浓度之间也要冲洗这么久吗？ [打印本页]

作者: outeer 时间: 2015-3-27 23:15 标题: 做完一种浓度而后做下一个浓度之间也要冲洗这么久吗？

各位大神恳请帮助
最近在做反向离子对色谱
看到文献上说柱子做过离子对之后至少要冲一个小时以上
我的实验需要优化离子对试剂的浓度，做完一种浓度而后做下一个浓度之间也要冲洗这么久吗？

另外，水相原本是乙酸-乙酸铵的缓冲溶液（均0.1M）,而离子对可能会对流动相的pH稍有影响，需要在配制完不同浓度含离子对试剂的缓冲液后调整pH吗？

越做实验越来越发现色谱知识博大精深啊，自己才只是学了个皮毛而已，求各位大神慷慨帮助，不胜感激！

作者: 冰@舟 时间: 2015-3-27 23:15

连续优化离子对试剂的浓度不需要冲洗1 h的，柱子用过离子对试剂之后，比较难冲洗干净，才用长时间冲洗。但是一般用过离子对试剂的柱子就专门用来做离子对色谱了。

作者: XXXX111 时间: 2015-3-27 23:18

缓冲体系在其缓冲范围之内，一般不需要重新调节pH值的。

作者: 差不多先生 时间: 2015-3-27 23:20 标题: 回复 #3 XXXX111 的帖子

请教一下，您一般离子对试剂的流动相平衡柱子多久呢？我做离子对试剂的种类和浓度优化，每变化一次条件都要重新平衡很久吗？

作者: 孤独的渔夫 时间: 2015-3-27 23:22 标题: 回复 #4 差不多先生的帖子

一般来讲需要比正常的反相色谱平衡时间至少长一倍~150 mm柱子至少30 min。如果是换离子对试剂种类的话，重新平衡也需要30 min以上。同样的离子对试剂仅仅是浓度改变的话，可以适当减短一点~

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