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标题: 【求助】我想做植物叶片、茎秆的扫描电镜 [打印本页]

作者: wwwh 时间: 2015-7-15 10:29 标题: 【求助】我想做植物叶片、茎秆的扫描电镜

各位高手，想请教一下，我想做植物叶片、茎秆的扫描电镜，观察比较发病和没发病的叶片等。
（1）我知道叶片可以用2.5%的戊二醛固定，然后4℃保存；但是不知道植物的茎段怎么固定处理？
（2）我们刚从外地采样回实验室，放在-20℃冰箱保存，这样能够保存多久呢？放久了会不会影响发病植物样品的结构呢？如果现在把样品都放在戊二醛里面固定，4℃冰箱又能保存多久呢？
（3）电镜样品固定后要脱水、干燥等，那么植物叶片、茎段这样的样品有没有特别的处理方法呢？有什么注意事项吗？

作者: 女儿情 时间: 2015-7-15 10:29 标题: 【回复】

叶片如果可以，就应该用Cryo-SEM，低温扫描电镜做。
茎的话，如果可以先拍显微镜或者相机拍下。然后直接上SEM。因为茎的结构比较牢固，相对来说，不是那么容易变形。所以没有必要再脱水什么的。直接喷金就OK了。
生物材料，最忌讳放的时间长。尽可能做掉吧。

作者: xiaoxiaoai 时间: 2015-7-15 10:30 标题: 【回复】

是的
尽快做
-20℃久了结构就不好了

作者: QQ爱 时间: 2015-7-15 10:30 标题: 【回复】

我们的测试中心可以做环扫，但是那边的老师要求我们要自己处理样品，而且因为用的高真空模式所以要求样品要干燥。所以想请教各位植物组织的固定、脱水、干燥等步骤有特殊要求吗？具体是什么样的呢？
其次，难道茎部只用固定处理然后直接喷金观察吗？

作者: 今生如此 时间: 2015-7-15 10:31 标题: 【回复】

根据你们的条件，我估计你做样品有点难度。
你们的电镜可能不是用来做生物鲜样分析的。
如果是做生物鲜样分析，一般都会配低温冷台。可以使样品在-180C以下进行SEM拍摄。

作者: PP熊 时间: 2015-7-15 10:31 标题: 【回复】

可能你的情况的确需要经过脱水处理。
不管怎么样的处理，你都不可能达到原始样品的样子，所以也无所谓怎么处理合适了。先将就拍拍看，是否能够有你想要的数据。
如果真的不能够满意，建议你们取样品后，直接联系有CryoSEM的单位。
千把块钱应该能够拍到。

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