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标题: 【求助】液质维护和故障排除过程中遇到的一些疑惑 [打印本页]
作者: pore    时间: 2015-9-22 10:36     标题: 【求助】液质维护和故障排除过程中遇到的一些疑惑

相关检测项目：
液质  泵  异丙醇  过滤器  高达

一、先说一下仪器配置，本人单位液质配置：Agilent 1200二元泵+6410B QQQ三重四极杆质谱
二、再说一下事情的起因：一个月前开始用液质进行药物制剂分析，进了几针，发现基线有很多杂峰，反复试了多次，依旧没有消除，怀疑LCMS有污染，于是做了一次近一个月的液质维护和故障排除。
三、维护与故障排除工作主要做了以下几个方面：
1、拆卸了手动进样阀并清洗，当初买液质的时候只配了手动进样，不过现在自动进样器在采购中。
2、更换了purge阀过滤白头。
3、拆下二元泵的两个入口主动阀阀芯，并超声清洗。
4、拆下两个出口阀，并在异丙醇和甲醇中超声。
5、更换了LC在线过滤器滤芯，并更换了MS的在线过滤器滤芯。
6、清洗了ESI离子源，并更换了ESI雾化器喷针。
7、卸真空停机，彻底清洗ESI源，打磨毛细管入口挡板和毛细管帽，并清洗MS毛细管。
8、更换新鲜的甲醇、乙腈和纯水反复试机。
9、更换不同色谱柱，或断开色谱柱与质谱直联后反复试机。
10、更换调谐液，对MS进行了重新调谐。
以上这些不是一口气做的，每做一项，都进行验证故障是否消除，总之是采取逐一排除法，最终基线有较大改善，故障原因主要来自于流动相，当然彻底的维护有助于改善基线。这次贴子不深究故障排除的详细过程，而是讨论在做这一系列维护和故障排除工作，遇到了很多让人费解的事情，特一一罗列出来，请高手指教。
一、问题一：我们的液质最近加配了一台ParKer的氮气发生器，这里有两个疑惑，一是怎样确认氮气发生器提供的N2中没有污染物？我是这样做的，把MS处于ON状态，将LC切换到Waste状态，观察在线的质谱图，如果信号特别低，就说明氮气发生器没有带出污染物，反之则有，不知道我这样的做法对不对？  另外在维护ESI源时，在拆除接入ESI接口时，氮气发生器产生的N2气流会有间隔很短时间的中断，而且是有规律的短暂中断，不知道氮气发生器产生这样不连续的N2气流是不是正确？会不会对质谱分析过程中产生影响？
二、问题二：在拆下两个出口阀，并在异丙醇和甲醇中超声后，事后我后悔了，因为超声完后，泵的压力没有以前稳定，超声的方法是听一位安捷伦液质工程师所说明，但压力变得波动后，询问800工程师，却指出不该超声出口阀，怀疑超声破坏了出口阀内部单向阀结构，这个问题您怎么看？经过几轮调整，并用甲醇-异丙醇-乙腈来回冲洗，现在单用A泵和B泵，柱压波动在1bar 左右，如果A、B泵溶剂相混合，波动会加大，特别A泵比例更大时（A泵一直为水相）波动在3-4bar ，不知道这样的波动是否调回了正常范围？除了更换整个出口阀的方法外，还有没有其他补救方法？
三、问题三：更换ESI雾化针时，可否只换针就可以，还是要针端的螺纹管和石墨垫一起换？
四、问题四：在维护过程中，用了一些以前存在LC溶剂瓶中没有用完的乙腈，发现基线高达700K，更换新的乙腈后，基线降至100K以下，有机相不是可以放置很多天吗？那么从原装瓶内取出的乙腈或甲醇，多长时间要用完啊？没用完该如何保存？
五、问题五：在基线改善的同时，还是看到ESI（+）模式下，m/z114、249.2、362.2、475.3、588.4等杂峰，且很活跃，不知大家能否解答这些离子峰的来源？
先这几个问题，请高手们指教！
作者: 尼赫鲁    时间: 2015-9-22 10:36

问题一：不是很清楚你的问题,理论上但其发生器提供的氮气没有问题,通常压缩机采用无油机型,污染源基本不会很多,如果有条件可以采用餐饮油烟的检测方式对气体进行红外扫描,貌似比较靠谱。
问题二：出口阀的清洗一般液相厂家不建议拆解，超声应该问题不大，根据你的数据看，貌似在正常范围。
问题三：毛细管的更换建议全套整体更换，预防出现密封部件问题导致重新维护
问题四：查阅文献，液质中也会出现一些常见离子碎片，根据使用记录做好相应的清洗。
建议：不接色谱柱，使用不高于60摄氏度的纯水依次Purge每个通道，然后冲洗整个系统，对出口阀和管路中可能存在的盐效果不错。
整个维护中没有提及溶剂滤头的清洗或更换，需要定期清洗或更换，玻璃或陶瓷材料不建议超声，稀酸浸泡或煮一下。个人建议，仅供参考！
作者: uaubc    时间: 2015-9-22 10:37

关于问题5，是不是还有227的峰？比249小，你没有列出来是不是？
我遇到过这个情况，113的聚合倍峰，流动相的问题！换一批流动相试试
作者: owanaka    时间: 2015-9-22 10:37

不很清楚一直用的是自动进样，质谱是飞行时间。。。。
作者: qumm1985    时间: 2015-9-22 10:38

问题一，氮气发生器产的氮气纯度上确实不如液氮罐，但也能达到液质的要求。发生器内部都有滤膜，滤膜定期更换就行，主流的氮气发生器都会有LED灯提示发生器需要维护。而且质谱本身在气体管路上也有捕集阱，过滤掉杂质的。进ESI源的气体本就不是连续的，属正常现象。
问题二，入口阀和出口阀的阀芯都是可以超声的，只不过出口阀的阀体比较脆弱，容易在超声时解体，所以需要谨慎操作。从楼主的描述来看，只是压力波动稍大，应该还不是解体了，这种问题原因多是安装时阀芯上的金垫螺纹没有对好，造成流路没有完全吻合，可以尝试重新安装，实在不行换金垫试试。
问题三，ESI雾化针是靠石墨垫固定位置的，顶端一定要平齐，且两者密合要好，否则会导致喷雾不稳，因此换雾化针时石墨垫一定要更换的。
问题四，有机相也不是可以用很多天的，尤其是乙腈，本身具有光照条件下分子间自聚积的特点，因此建议2-3天更换。最根本的办法还是根据使用情况适当添加，以免造成浪费。
问题五，杂质离子大部分来自流动相。任何厂家、任何纯度的试剂都会有杂质离子，排查的话可以考虑更换不同批次、不同品牌的试剂，看这些干扰离子是否还在。除此之外，也有可能来自已经受污染的溶剂瓶、液相管路等，可以用热水和异丙醇冲洗。
以上希望能帮到你。
作者: seagate    时间: 2015-9-22 10:38

问题一：氮气发生器产生的氮气一般可以满足液质使用，但气体捕集阱用时间长了会脏，怀疑是气路脏可以把捕集阱拆掉直接接仪器来排除，看是不是捕集阱脏了。
问题二：压力波动3-4 bar稍大一点，还可以接受。
问题三：喷雾针我换过一次，石墨垫好像是要换，一次性成型的吧
问题四：个人感觉乙腈放时间长点在质谱上不会有那么大的波动，会不会污染了，或者是假的试剂，sigma的试剂我碰到过假的
问题五：249应该是塑化剂的峰吧
作者: 白白的    时间: 2015-9-22 10:38

回答我知道的几个问题：
问题一：如果污染物不易离子化，即使进质谱也无法检测到。一般氮气发生器的出口气路上连接气体捕集阱，可以对气体进行过滤；
问题四：有机相时间久了会变质的，其中国产的更为明显；
问题五：不知你的流动相是否用尼龙滤膜过滤过，其中这几个相差113的离子峰是尼龙6， 结构 [  NH  ( CN2)5  CO  ]n，我的试验也出现过这几个离子峰。
希望对你有所帮助！
作者: 9900    时间: 2015-9-22 10:39

1、拆卸了手动进样阀并清洗，当初买液质的时候只配了手动进样，不过现在自动进样器在采购中。

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观察进样阀定子和转子面是否有磨损，尤其是转子面，进样针针头是否平齐。
作者: 9900    时间: 2015-9-22 10:39

2、更换了purge阀过滤白头。

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注意更换前后压力变化。
作者: 9900    时间: 2015-9-22 10:40

4、拆下两个出口阀，并在异丙醇和甲醇中超声。

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不会超坏，不要倒置，如果内部小部件出现损坏会导致压力波动，就需要更换了，下图为单向阀内部部件，比较复杂，不要随便拆
作者: 9900    时间: 2015-9-22 10:40

7、卸真空停机，彻底清洗ESI源，打磨毛细管入口挡板和毛细管帽，并清洗MS毛细管。

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毛细管帽不可以打磨，主要清洗内壁。
作者: 9900    时间: 2015-9-22 10:41

问题一：我们的液质最近加配了一台ParKer的氮气发生器，这里有两个疑惑，一是怎样确认氮气发生器提供的N2中没有污染物？我是这样做的，把MS处于ON状态，将LC切换到Waste状态，观察在线的质谱图，如果信号特别低，就说明氮气发生器没有带出污染物，反之则有，不知道我这样的做法对不对？ 另外在维护ESI源时，在拆除接入ESI接口时，氮气发生器产生的N2气流会有间隔很短时间的中断，而且是有规律的短暂中断，不知道氮气发生器产生这样不连续的N2气流是不是正确？会不会对质谱分析过程中产生影响？

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氮气要保证流量和纯度，另外不要带入杂质，可加捕集阱来吸附杂质，如果怀疑氮气带来杂质，可继续订购一罐液氮来比较下两者差别。
作者: 9900    时间: 2015-9-22 10:41

问题二：在拆下两个出口阀，并在异丙醇和甲醇中超声后，事后我后悔了，因为超声完后，泵的压力没有以前稳定，超声的方法是听一位安捷伦液质工程师所说明，但压力变得波动后，询问800工程师，却指出不该超声出口阀，怀疑超声破坏了出口阀内部单向阀结构，这个问题您怎么看？经过几轮调整，并用甲醇-异丙醇-乙腈来回冲洗，现在单用A泵和B泵，柱压波动在1bar左右，如果A、B泵溶剂相混合，波动会加大，特别A泵比例更大时（A泵一直为水相）波动在3-4bar，不知道这样的波动是否调回了正常范围？除了更换整个出口阀的方法外，还有没有其他补救方法？

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purge时间长一点，有可能会有很小的气泡残留在系统中。
作者: 9900    时间: 2015-9-22 10:42

问题三：更换ESI雾化针时，可否只换针就可以，还是要针端的螺纹管和石墨垫一起换？

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雾化针是一组套件，更换整个套件就可以了，正常安装组件之后，螺纹管和石墨垫是卡死的，但有时卡的不紧可以把针抽下来。
作者: 9900    时间: 2015-9-22 10:42

问题四：在维护过程中，用了一些以前存在LC溶剂瓶中没有用完的乙腈，发现基线高达700K，更换新的乙腈后，基线降至100K以下，有机相不是可以放置很多天吗？那么从原装瓶内取出的乙腈或甲醇，多长时间要用完啊？没用完该如何保存？

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使用乙腈做流动相的时候要注意，乙腈不要使用太长时间，并且尽量不要用100%乙腈跑，因为乙腈会生产二聚体，有时候会使单向阀粘连，对系统有伤害，所以乙腈作为流动相不要用太长时间。
作者: 9900    时间: 2015-9-22 10:42

问题五：在基线改善的同时，还是看到ESI（+）模式下，m/z114、249.2、362.2、475.3、588.4等杂峰，且很活跃，不知大家能否解答这些离子峰的来源？

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关于干扰离子来源可尝试改变不同流动相来检查是否来自流动相和LC系统，通过将LC切换到Waste状态来查看是否来自于质谱系统，有些干扰离子很难排除，只要是明确的并且不影响待测化合物，可不必过于计较。
作者: mysmdbl    时间: 2015-9-22 10:51

上图~~~~~~~~~~~~~

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http://bbs.antpedia.com/attachment.php?aid=37482

作者: mysmdbl    时间: 2015-9-22 10:53

1、拆卸了手动进样阀并清洗，当初买液质的时候只配了手动进样，不过现在自动进样器在采购中。

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观察进样阀定子和转子面是否有磨损，尤其是转子面，进样针针头是否平齐。
作者: mysmdbl    时间: 2015-9-22 10:53

2、更换了purge阀过滤白头。

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注意更换前后压力变化。
作者: mysmdbl    时间: 2015-9-22 10:55

4、拆下两个出口阀，并在异丙醇和甲醇中超声。

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不会超坏，不要倒置，如果内部小部件出现损坏会导致压力波动，就需要更换了，下图为单向阀内部部件，比较复杂，不要随便拆

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作者: mysmdbl    时间: 2015-9-22 10:55

7、卸真空停机，彻底清洗ESI源，打磨毛细管入口挡板和毛细管帽，并清洗MS毛细管。

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毛细管帽不可以打磨，主要清洗内壁。
作者: ffaa    时间: 2015-9-22 10:55

问题四：装乙腈的瓶子也要确保下质量，有一次用了一个国产的蓝盖瓶装乙腈，时间长一点会有白色沉淀。有些棕色的蓝盖瓶甚至会掉色。
作者: lxh031    时间: 2015-9-22 10:56

249肯定不是塑料，塑料会是一大片
作者: popo520    时间: 2015-9-22 10:57

气体，换瓶高纯氮试试
作者: popo520    时间: 2015-9-22 10:58

换另一批号试剂试试



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