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标题: 【求助】我想求助下如何除去样品里的RNA [打印本页]

作者: 小妖精@ 时间: 2015-10-23 12:52 标题: 【求助】我想求助下如何除去样品里的RNA

我提取完质粒后电泳鉴定发现有很多RNA 测下OD 260/280比值大于2
我想求助下如何除去样品里的RNA

作者: 美人鱼 时间: 2015-10-23 12:53 标题: 回复

加RNase A 消化去除RNA。可以先加1 ul或2ul，37度水浴1-2小时（如果RNA实在太多，仍可消化过夜），然后取一点电泳看看RNA是否已去除。
作为要求严格的实验在消化后最好再进行氯仿抽提一下去除RNase，视你后续实验而定。

作者: p1900 时间: 2015-10-23 12:53 标题: 回复

自己手提的是吧？最好一次提取用的菌液少点，这样消化起来也更快更干净。RNase A一般浓度达到100ug/ml就可以了。另外，RNase A容易失活，最好能确定其是否失效。

作者: jishiben 时间: 2015-10-23 12:54 标题: 回复

不需要管过几天就没了。。。RNA太容易降解，要快就加RNase吧

作者: 小女人@ 时间: 2015-10-23 12:54 标题: 回复

最好溶解的时候用加有RNAse的水溶解就好了。

作者: yayayu 时间: 2015-10-23 12:55 标题: 回复

用试剂盒吧，方便也便宜，从没发现RNA的污染，生工的才几毛钱一个样

作者: huali 时间: 2015-10-23 12:55 标题: 回复

试剂盒中一般都会带有RNA酶，一般加到P1里面就能解决问题，楼主不会现在还用手提把？

作者: zouyou 时间: 2015-10-23 12:56 标题: 回复

RNase是处理的有效方法，注意保证试剂活性，添加量100ug/ml。实验遇到过顽固的RNA，自行降解很缓慢。如果实在难去除，建议考虑过夜处理。

作者: aaby 时间: 2015-10-23 12:56 标题: 回复

我们把RNase配成10mg的母液，然后每毫升TE里面就加2ul的RNase，就用TE溶质粒，RNA就没有了，RNase很稳定的

作者: PP熊 时间: 2015-10-23 12:57 标题: 回复

jok:RNA 本身就容易降解，因为环境中RNase 比较多，不放心就再加点吧，或者可以试试用RNA清除剂处理一下实验环境

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