分析测试百科

标题: 液相色谱流动相若用磷酸调pH值相关问题？ [打印本页]

作者: qianxiang23 时间: 2011-9-21 13:52 标题: 液相色谱流动相若用磷酸调pH值相关问题？

弱弱地问，液相色谱中，流动相若用磷酸调pH值至4，调过了，pH到3了，怎么办？用NaOH滴加中和吗？一般多少浓度的NaOH？

液相色谱实验中，流动相的pH影响大吗？

液相色谱流动相中加入乙酸钠，用冰醋酸调pH；而流动相中加入磷酸二氢钾，用磷酸调pH，是要缓冲盐和对应的酸一起吗？若流动相中加入磷酸盐，是不是只能用磷酸调pH，不能用盐酸、冰醋酸？

恳请高手赐教，感激不尽！

作者: naren4545 时间: 2011-9-21 19:34

若流动相中加入磷酸盐，一般是用磷酸调pH的，钠盐用氢氧化钠，钾盐用相应的碱！

作者: unknow 时间: 2011-9-21 19:58 标题: 回复 #1 qianxiang23 的帖子

1、最好不要用碱反调，因为反调相当于加入了钠盐，就跟以前的流动相体系不同了，无法保证重复性。
2、你说的那些“对应”都是因为它们是一对缓冲对试剂，可构成缓冲盐。如果乱配，往往是得不偿失。比如磷酸二氢钾和盐酸搭配，缓冲液能力较低（因浓度较低，只能以磷酸二氢钾计），还多了氯离子的干扰，而且对于HPLC系统，不能用含有氯的溶剂，因其会对不锈钢管路产生腐蚀。

作者: 分析工 时间: 2011-9-21 21:56 标题: 回复 #1 qianxiang23 的帖子

磷酸加多了，再加水稀释

作者: thereyoube 时间: 2011-9-22 10:47

pH影响的大小，主要取决于样品酸碱性。样品中性，基本没啥影响，样品酸碱性，对保留时间影响较大，流动相pH在样品pKa正负1范围内变化，保留时间变化最大。

酸盐以对应的酸调pH，能形成较稳定的pH缓冲体系，若流动相有蒸发沉淀等变化，不至于流动相pH变化太大而造成保留时间发生变化。当然，以磷酸盐为例，若以盐酸、醋酸等调pH，亦未尝不可。

返调pH 的问题。理论上，是可以的。引入少量的盐，一般不会对峰型等造成加大的影响。浓度，随意。

作者: ttkl533 时间: 2011-9-22 10:52

最好重新另配缓冲液，因为流动相最好不要含有过多盐的成分，对柱子损伤很大。而且柱子的pH使用范围是一定的。流动相中加入磷酸盐，最好用磷酸调啊，否则引入其他的杂质

作者: hplcangel 时间: 2011-9-22 12:06

HPLC中，流动相若用磷酸调pH值至4，调过了，pH到3，若是对浓度要求不是很严格，且现在的浓度还不是很大，可用磷酸氢二钾或磷酸氢二钠调，一般不用氢氧化钠来调，最好让水相形成缓冲盐。

作者: fjdlgldg 时间: 2011-9-22 12:08

我觉得不是随意更改的，对结果有影响

作者: ross_racheal 时间: 2011-9-22 13:46

调过了就重配不能回调假如是磷酸盐最好用磷酸调ph

作者: Geochimica 时间: 2011-9-22 14:09

重配就是了，可以用希磷酸调吗。用氢氧化钠回调不好，毁柱子，还会磨损泵头密封圈。划伤宝石柱。其实最好不要用缓冲盐体系。用也要慎重。

作者: chongwenmen 时间: 2011-9-22 14:21

我也做过流动相要调PH的，一般来说，调PH说明你的物质对PH还是相对敏感的，我建议你可以试试用三乙胺调回来，一方面可以调正PH，另一方面，你的峰也减少了拖尾的现象发生。
你最好选用相应的盐调PH。

作者: piaoliang110mei 时间: 2011-9-22 14:56

分情况
1、如果是已有方法（包括已有标准及已有明确文献），则应严格按标准方法操作，随意改动是不可取的。尤其不能加入原系统注明成分之外的其他成分。其中如果是文献的方法，建议完整重现后再尝试优化。

2、如果是新建方法则相对灵活，诸如另加加扫尾剂这些措施都是可以选择的。一般来说缓冲对还是比较考究的，如磷酸及磷酸盐，醋酸及醋酸盐，盐酸及氯化钾（美国药典），等等，这些缓冲对出来的结果往往以pH为系统评价最关键，但绝对不是只看pH。

3、缓冲对的成分，很多情况下是可以替换的。但是绝对不是没有影响，我曾经做过一些尝试，比如以钠盐替换钾盐制备缓冲系统，结果很多不可重现。当然，也有可能是我有些操作细节没有注意到，但是，与其这样引进一些不稳定因素，去查原因，还是循规蹈矩来的好。

作者: iwfi325iwc 时间: 2011-9-23 11:39

可以用乙醇胺回调。

作者: iwfi325iwc 时间: 2011-9-23 11:40

最好是用换成盐来调节Ph

作者: kflsjjfdl 时间: 2011-9-23 11:42

1、可以调一下，不过建议重配；及时pH一样，浓度不一样时候，有时对结果影响挺大
2、用NaOH调为什么不可以呢？我觉得完全可以，再说本来lz要的就是酸体系；
3、我们一般都不用盐酸的，因为据说（我么有验证过）盐酸对不锈钢系统的影响较大

作者: santa 时间: 2011-9-23 11:47

听我的老师讲，三乙胺对柱子损伤挺大的，如果一定要用浓度不要太高

作者: 感悟人生 时间: 2011-9-24 11:02

昏，用那么多盐。仪器管路会容易被析出的盐堵塞的。这样子要么重新配制，要么就用这个流动相试下分离是不是好了。

作者: HEC_css 时间: 2011-9-24 11:05

流动相之所以选择磷酸盐（钾盐、钠盐）缓冲体系，是因为磷酸盐缓冲液可以提供稳定的pH环境，利于分离。再者钾离子、钠离子皆有饱和柱子的活性中心，避免分析物质与活性中心结合，造成峰拖尾，变宽。其中钾离子的作用强于钠离子。

pH调过了，用一点的氢氧化钠也可以，因为只要在磷酸盐的缓冲范围内，一点改变对于整个系统是没什么影响的。这只是一般情况，特殊情况特殊考虑。

如果流动相里有磷酸最好还是别加醋酸，两者的缓冲范围不太一样，（两个缓冲系统），这个和上面的氢氧化钠不同。

欢迎光临分析测试百科 (http://bbs.antpedia.com/)