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标题: 【求助】PCR完后是4度保存还是20度保存好? [打印本页]

作者: 穿越时空 时间: 2015-11-7 16:37 标题: 【求助】PCR完后是4度保存还是20度保存好?

一般PCR的最后一步都是4度保存,就是在不能及时拿出的情况下作为临时的冰箱使,我看到有些程序最后一步是20度保存,这样PCR产物会不会有问题,当然对PCR仪肯定要轻松些,欢迎大家讨论!
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作者: feixi 时间: 2015-11-7 16:38

4°是冲着过夜的
20°是冲着吃顿饭就回来Run gel的
个人观点，o(∩_∩)o...哈哈
没用过20°保存的，也没见过周围xdjm用。
不推荐20°，减轻pcr仪大可通过事先计算好时间，准时拿出样本，停机，放4°冰箱里

作者: 穿越时空 时间: 2015-11-7 16:38

我们这里如果不是特殊情况的话PCR仪器不能4度过夜,否则抓到罚款,呵呵
我觉得20度2个小时左右也没什么问题吧,室温不是也可以放很长时间么

作者: vvmmoy 时间: 2015-11-7 16:58

我都-20保存呢，不会有影响吧？

作者: any333 时间: 2015-11-7 16:58

看到以前的贴子说，如果把４度冰箱保存ＰＣＲ产物超过两天，会使ＰＣＲ产物受到影响；另一种说法是ＰＣＲ产物最好抓紧时间跑电泳．
前几天把ＰＣＲ产物放在４度放了两天，以前有条带的，后面再跑就没有了，觉得有可能是温度太高的原因，现在看到楼上的还有把产物放在四度冰箱保存的　，不是太理解
我现在都是在零下２０度保存了
大家都是在几度冰箱保存呢　

作者: 131415 时间: 2015-11-7 16:58

一般ＰＣＲ完了如果不能及时取出就设１０度保存，个人感觉效果不错，对ＰＣＲ仪的影响也比较小

作者: u234 时间: 2015-11-7 16:58

1 对于PCR反应过程中的保温温度，一般是4度，但是有时为了机子的保养，国外一般设成10度，这样可以延长仪器的使用寿命，并且对产物没有什么影响。
2 对于反应后的PCR产物，在跑胶以前可以放在4度，并且放上至少1月没问题，我曾经用1月前的产物，跑的带和原来刚做完PCR的带差异不大。但是为了长期保存当然是－20度好了。

作者: bojitu 时间: 2015-11-7 16:59

PCR产物放4度是绝对没有问题的,至于楼上有位说后来跑不出东西肯定是其他地方出问题了.我们这里有时候3个月前东西还拿出来跑PAGE胶呢(从4度),效果和以前一样,有时候还比第一次效果好

作者: 穿越时空 时间: 2015-11-7 16:59

谢谢楼上的指点 ,果真如此,那可能就是别的原因了

作者: seagate 时间: 2015-11-7 17:00

哈哈 4℃最好

作者: vera+ 时间: 2015-11-7 17:00

当然4度，-20度除了浪费PCR仪外，对PCR产物没有坏处。就DNA质量来说，室温也没有问题，本人一直是PCR结束后4度5分钟然后即使过夜也是室温，无论用于cloning或是其他目的，都没有出现问题，DNA的降解主要由DNAse引起，如果DNAse free，温度不是主要因素。

作者: cocacola 时间: 2015-11-7 17:00

4度保存，最好尽快跑电泳...

作者: iii_ii 时间: 2015-11-7 17:04

我遇到过这种情况，4度存放一段时间后，产物降解掉了

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