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【求助】我想求助下 如何除去样品里的RNA
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作者:
yazi
时间:
2015-11-12 12:48
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【求助】我想求助下 如何除去样品里的RNA
我提取完质粒后 电泳鉴定 发现有很多RNA 测下OD 260/280比值大于2
我想求助下 如何除去样品里的RNA
作者:
蓝色雨梦
时间:
2015-11-12 12:49
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【回复】
加RNase A 消化去除RNA。可以先加1 ul或2ul,37度水浴1-2小时(如果RNA实在太多,仍可消化过夜),然后取一点电泳看看RNA是否已去除。
作为要求严格的实验在消化后最好再进行氯仿抽提一下去除RNase,视你后续实验而定。
作者:
8899
时间:
2015-11-12 12:49
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【回复】
自己手提的是吧?最好一次提取用的菌液少点,这样消化起来也更快更干净。RNase A一般浓度达到100ug/ml就可以了。另外,RNase A容易失活,最好能确定其是否失效。
作者:
QQ爱
时间:
2015-11-12 12:50
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【回复】
不需要管 过几天就没了。。。RNA太容易降解,要快就加RNase吧
作者:
无怨无悔
时间:
2015-11-12 12:50
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【回复】
最好溶解的时候用加有RNAse的水溶解就好了。
作者:
xiaoxiaoai
时间:
2015-11-12 12:50
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【回复】
用试剂盒吧,方便也便宜,从没发现RNA的污染,生工的才几毛钱一个样
作者:
malong
时间:
2015-11-12 12:51
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【回复】
试剂盒中一般都会带有RNA酶,一般加到P1里面就能解决问题,楼主不会现在还用手提把?
作者:
jishiben
时间:
2015-11-12 12:51
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【回复】
RNase是处理的有效方法,注意保证试剂活性,添加量100ug/ml。实验遇到过顽固的RNA,自行降解很缓慢。如果实在难去除,建议考虑过夜处理。
作者:
n111
时间:
2015-11-12 12:51
标题:
【回复】
我们把RNase配成10mg的母液,然后每毫升TE里面就加2ul的RNase,就用TE溶质粒,RNA就没有了,RNase很稳定的
作者:
PP熊
时间:
2015-11-12 12:52
标题:
【回复】
jok:RNA 本身就容易降解,因为环境中RNase 比较多,不放心就再加点吧,或者可以试试用RNA清除剂处理一下实验环境
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