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标题: 【求助】油酸、棕榈酸、亚油酸配制 [打印本页]

作者: dreaming 时间: 2015-12-11 10:54 标题: 【求助】油酸、棕榈酸、亚油酸配制

各位大侠，小弟想添加油酸、棕榈酸、亚油酸到细胞培养基中，但是发现其溶解非常老火，想请求各位给我点建议，谢谢！

作者: moonlight 时间: 2015-12-11 10:54

油酸溶解于乙醇，亚油酸溶解于乙醇或1N NaOH。附件中是细胞培养级的油酸和亚油酸的分子量、储存温度及溶解情况。
棕榈酸：palmitic acid
Molecular Formula： CH3(CH2)14COOH
Molecular Weight ：256.42
TEST： SPECIFICATION
APPEARANCE ：WHITE POWDER
SOLUBILITY： CLEAR COLORLESS SOLUTION AT 100MG/ML IN CHLOROFORM

作者: HP007 时间: 2015-12-11 10:55

请问楼上两位，你们溶解棕榈酸的方法是什么？你们的的问题解决了吗，我用乙醇可以溶解棕榈酸，但加到培基里就析出了。请指教，谢谢！

作者: qhyu 时间: 2015-12-11 10:55

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5％的BSA，加0.1MKOH，然后摇45min，效果非常不错，文献里也是这么教的！

作者: HP007 时间: 2015-12-11 10:56

谢谢楼上战友，请问用什么来摇，需要水浴吗？按你的方法储存液一般能配成多高的浓度？你所说的文献可以发给我或者给个链接吗？
我现在是参照外文,先加NAOH溶解，然后55度水浴、振荡的同时用10%的BSA配成5mmol/l的储存液，用的时候水浴后再稀释，这样不会析出。但问题是储存液浓度太低，这样我给细胞造模时FFA占培养基的体积较大，影响检测，我曾多次试过提高储存液浓度，但没成功，浓度高的话加到培基就容易析出！
请指教，谢谢！

作者: qhyu 时间: 2015-12-11 10:56

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原帖由 HP007 于 2015-12-11 10:56 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

谢谢楼上战友，请问用什么来摇，需要水浴吗？按你的方法储存液一般能配成多高的浓度？你所说的文献可以发给我或者给个链接吗？
我现在是参照外文,先加NAOH溶解，然后55度水浴、振荡的同时用10%的BSA配成5mmol/l的储存液，用的时候 ...

恒温箱里就可以，另外超声一下效果也不错，5mM浓度确实比较大，会有细胞毒性的，我配制的只是1mM的母液，再大的就没有做过了！

作者: HP007 时间: 2015-12-11 10:57

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谢谢！用什么来摇45min？你仍没有回答啊。你的文献能看看吗？我说的5mM储存液是母液，加入细胞培养基内是要稀释的，终浓度最高是1mM。你说你配制的是1mM的母液，那么加入细胞内的终浓度为多少？
我现在就是想提高储存液浓度，这样细胞造模时FFA占培养基的体积才会减少。但没成功，浓度高的话加到培基就容易析出！

作者: qhyu 时间: 2015-12-11 10:57

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谢谢！用什么来摇45min？你仍没有回答啊。你的文献能看看吗？我说的5mM储存液是母液，加入细胞培养基内是要稀释的，终浓度最高是1mM。你说你配制的是1mM的母液，那么加入细胞内的终浓度为多少？
...

用恒温震荡培养箱，我加入细胞中的浓度大约只有0－100微M，我建议你可以加大BSA的量，因为FFA是结合在BSA上的！

作者: ladyhuahua 时间: 2015-12-11 10:57

请问可以用10%胎牛血清配亚油酸吗？新手，请各位大侠赐教！

作者: chenshuanhe 时间: 2015-12-11 10:58

各位大神【求助】棕榈酸配制方法？

作者: biabiade 时间: 2015-12-11 10:58

求助粉末状油酸配制方法？

作者: DDD 时间: 2015-12-11 10:58

各位高手，想请教下PA粉末怎么配制，然后要怎样过滤除菌，越详细越好，或者有没有文献可以推荐下，谢谢！

作者: DDD 时间: 2015-12-11 10:59

还有PA具体的过滤消毒要怎么弄呢？要买滤器还是可以用滤膜？

作者: popo520 时间: 2015-12-11 10:59

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原帖由 DDD 于 2015-12-11 10:59 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

还有PA具体的过滤消毒要怎么弄呢？要买滤器还是可以用滤膜？

滤器过滤即可

作者: ffaa 时间: 2015-12-11 11:01

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向大家连接一个英文文献，里面讲的非常清楚，再经过试验之后我发现用0.45um的滤膜过滤是有问题的，油酸会被吸附在滤膜上。可能与之前学姐将油酸放在常温下太久导致氧化所致，希望大家在看了文献实践之后告诉我你们过滤是否也会遇到这一问题，共同探讨学习，谢谢“Free Fatty Acid-Induced Inhibition of Glucose and Insulin-Like Growth Factor I-Induced Deoxyribonucleic Acid Synthesis in the Pancreatic b-Cell Line INS-1*”。

作者: ffaa 时间: 2015-12-11 11:03

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这是从复旦大学一个师兄的毕业论文里摘的，粉剂的配置，问题：如何过滤？
油酸(OleicAcid,OA)储存液的配制：
称取50mg油酸钠(分子量:304.45)置于1.5ml EP管中,加入1080uL 0.lmmol/LNaOH溶液,置于90°C以上水浴中加热并不断摇晃,5-10分钟左右可完全溶解。趁热移入15ml离心管中,并向其中加入5%BSA溶液使最终体积为10.8ml。油酸储存液的终浓度为15mmol/L;
棕榈酸(PalmiticAcid,PA)储存液的配制
称取23mg棕榈酸钠(分子量:278.41)置于1.5ml EP管中,加入540^iLO.lmmol/LNaOH溶液,置于90°C以上水浴中加热并不断摇晃,5-10分钟左右可完全溶解。趁热移入15ml离心管中,并向其中加入5%BSA溶液使最终体积为5.4ml。棕榈酸储存液的终浓度为15mmol/L;3.4含Immol/LFFA (OA: PA=2:1)的完全培养基的配制取226.8ml含10%胎牛血清和lOOU/ml青霉素/链霉素的高糖DMEM培养基,并将上述10.8nil的油酸储存液和5.4ml的棕摘酸储存液加入其中,混勻,即得到243ml含Immol/LFFA (OA: PA=2:1,比例为摩尔比)的完全培养基。

作者: kuohao17 时间: 2015-12-11 11:03

最近也准备买油酸和棕榈酸，准备诱导细胞呈脂肪病变，但在购买时就很纠结了，不知道买油酸和棕榈酸还是他们的钠盐，来丁香园搜了之后，发现这两者都很难溶呢，想请问你买了哪种了呢？溶解了吗？可以传授些经验给我吗？

作者: 18721243449 时间: 2023-5-22 17:33 标题: BSA 棕榈酸钠储存液

本产品有效成分是软脂酸钠（棕榈酸钠）(Sodium Palmitate, 50 mmol/L)，用于构建高浓度自由脂肪酸诱导的细胞损伤模型及疾病动物模型，常用于2型糖尿病、非酒精性脂肪肝病等基础科学研究。产品溶剂包含水，无脂肪酸牛血清白蛋白及一种缓冲溶液，不含氢氧化钠或其他碱性试剂及有机溶剂，无细胞毒性。本产品经0.22微米滤器过滤除菌，稳定，易溶，可直接加入细胞培养基中使用。

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