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标题: 【转帖】反相色谱法用的乙腈和甲醇的区别 [打印本页]

作者: XYZQ 时间: 2016-1-25 15:36 标题: 【转帖】反相色谱法用的乙腈和甲醇的区别

1．分离（洗脱）的选择性---两者的差异
乙腈和甲醇在分离的选择性上不同。这是由于有机溶剂分子的化学性质（甲醇和乙醇是质子性，乙腈和四氢呋喃是非质子性）不同所至。
因此，在用乙腈类不能获得分离的选择性时，就试用甲醇类。
2．峰形---有时出现差异。
像水杨酸化合物（在邻位上具有羧基或甲氧基的苯酚化合物）等，用乙腈类时拖尾大，用甲醇类可抑制。这是由于（1）对于硅表面与目标成分的相互作用（附着）的流动相的有关，因有机溶剂分子的化学性质不同而已；（2）对处分溶解能力的不同所致。
可是，一般情况下，聚合物类反相柱，与硅胶柱相比，更具有峰形宽的倾向。特别是用聚苯乙烯柱分析芳香族化合物等时常见。这在流动相是甲醇时非常明显，而用乙腈就不明显。为此，用聚合物类反相柱时建议采用乙腈类。这是因为乙腈使凝胶膨胀。
3．流动相的脱气---乙腈类要注意
混合溶剂的置制，不说在LC装置内，只谈预先在流动相瓶内进行时（等浓度系统）。
甲醇与水混合时发热，多余的溶解空气较易变为脱出气泡（脱气容易）；而乙腈由于吸热冷却，随着慢慢回到室温，产生气泡。所以要考虑脱气（加温搅拌，过滤膜等）。
4．结论
以上反相色谱法流动相常用的乙腈和甲醇进行了比较。粗略地讲是“使用乙腈HPLC级最好。在选择性，峰形差时用甲醇HPLC级”。但是根据各种不同性质设计分析条件也是有必要的。

作者: summerxx 时间: 2016-1-25 15:39

个人的一点补充：乙腈相比较甲醇压力值较小，因此由于流动相流动过程中产生的阻力减小，从而使纵向扩散减小，因此最终的峰形比甲醇同条件下窄，所以显得效能相对较高，另外，对蛋白质的溶解方面比甲醇稍高，因此对于血液方面的样品，去除柱内的残留物质效能较甲醇高。仅仅个人的一些理解，不足之处请大家讨论指正。

作者: XYZQ 时间: 2016-1-25 15:44

压力的大小应该和溶剂本身的黏性有关吧？

作者: duchy 时间: 2016-1-25 15:44

为什么甲醇在同样的流速下在柱内会加上多余的压力？
想不明白。

作者: ha111 时间: 2016-1-25 15:45

甲醇和乙醇是质子性，乙腈和四氢呋喃是非质子性
质子性能洗脱哪一类物质？
非质子性能洗脱哪一类物质？
知道的能不能和我说明一下，我刚接触这个，先谢谢哈！

作者: feixi 时间: 2016-1-25 15:45

乙腈贵，乙腈毒性也比甲醇大多了，所以可以用甲醇就用甲醇了。

作者: Darcy 时间: 2016-1-25 15:46

为什么甲醇在同样的流速下在柱内会加上多余的压力？
想不明白。

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甲醇的粘度高于乙腈，同样的流速下，自然压力要高于乙腈

作者: iii_ii 时间: 2016-1-25 15:46

QUOTE:

原帖由 feixi 于 2016-1-25 15:45 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
乙腈贵，乙腈毒性也比甲醇大多了，所以可以用甲醇就用甲醇了。

究竟是甲醇毒还是乙腈毒呢？我还是觉得乙腈毒性小些。

作者: iii_ii 时间: 2016-1-25 15:47

乙腈截止波长195nm，甲醇205nm，低波长段下使用，只能是乙腈，用甲醇的话如LZ所言，鬼峰要多些。

作者: ROSE李 时间: 2016-1-25 15:47

关于乙腈的一点缺点：已经容易产生聚合物，所以使用的时候要放在棕色瓶子中，不要有光直射，而且要最好每次不要装很多，随用随装
已经产生的聚合物会在泵的单向阀和主动阀内沉积，造成关闭不严，使泵的流量精度下降，出现这种状况要用热水冲洗系统可以解决

作者: yizhi 时间: 2016-1-25 15:47

最近刚接触反相离子对色谱，打算用它来分离蛋白质样品柱子为Zorbax 300SB-C18
有以下几个问题请教各位：
一：对分离蛋白样品甲醇乙腈等有机溶剂是否会在分离时形成沉淀损坏柱子
二：使用什么离子对试剂比较好
三：甲醇和乙腈选哪个

因为刚学色谱问题比较白，请大家多包涵
尽量详细些

作者: XYZQ 时间: 2016-1-25 15:48

我没有做过蛋白
具体，你应该先看看相关的资料
根据别人的条件，再结合实际情况调整！

作者: 3.14 时间: 2016-1-25 15:49

乙腈和甲醇哪个对身体毒害更强?

作者: XYZQ 时间: 2016-1-25 15:50

好像两个都差不多
有人说乙腈强，我看瓶子上没什么区别

作者: 3N4G 时间: 2016-1-25 15:50

还有一点，乙腈和水混合，其粘度在乙腈和水之间，而且基本随水分的增多，呈线性增加，比较适合作梯度。
甲醇在40%时压力远高于单个的甲醇和水。

作者: ns5fan 时间: 2016-1-25 15:51

用了这么久的乙腈和甲醇，今天总算是比较明白了。

作者: toy 时间: 2016-1-25 15:52

用乙腈冲洗系统和用纯甲醇冲洗系统，乙腈的洗脱能力确实比甲醇要强。
纯甲醇冲洗不出来的，乙腈就可以冲洗出来。
我用的是岛津10A的仪器，用乙腈常常导致宝石球粘住，吸不上流动相，拆下来清洗特麻烦。
还有，听从各位老师所说的，往纯乙腈里加少量的水，宝石球粘住的几率稍微会下降。

作者: kuaizige 时间: 2016-1-25 15:53

都说乙腈的洗脱能力强，这个是不是跟物质的极性有关呢。

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