分析测试百科

标题: 【求助】对苯二胺硫酸盐液相色谱怎么打？ [打印本页]

作者: bbc 时间: 2016-1-29 16:19 标题: 【求助】对苯二胺硫酸盐液相色谱怎么打？

想问一下，对苯二胺硫酸盐、间苯二胺硫酸盐、邻苯二胺硫酸盐，用液相色谱打，C18柱能用吗？应配怎样的流动相？
它们的稀水溶液PH值在2-3左右。
我用硫酸调流动相PH到2左右，出两个峰。
又用三乙胺调PH到7多点，还是出两个峰。

作者: ALALA 时间: 2016-1-29 16:19

对苯二胺硫酸盐、间苯二胺硫酸盐、邻苯二胺硫酸盐，我想他们应该都是强酸性离子化合物，在酸性条件下以对苯二胺，间苯二胺，邻苯二胺形式存在。C-18可以做的，你讲的出两个峰是不是指有两个重叠了?把有机相配比调一下试试呢！

作者: yonger 时间: 2016-1-29 16:19

不是两个峰重叠了，第一个很高很窄的峰，三分钟左右后，出一个很矮很拖的峰。
我想在PH2-7不大可能以胺的形式存在，
第一个可能是胺硫酸盐的峰，第二个估计是胺的峰。

作者: bbc 时间: 2016-1-29 16:20

在C18柱适用的PH2-7之间，不大可能能全部以胺的形式存在吧？
第一个很高很窄的峰，三分钟后出个很矮很拖的峰，
我估计第一个是胺硫酸盐的峰，第二个是胺形式存在的峰
加酸加加碱我都试了一下，都是两个差不多的峰，第一个很高很窄的，第二个很矮很拖的
甲醇30水70

作者: bbc 时间: 2016-1-29 16:20

虽然我的年纪不小，可是我用的色谱少。没见过大场面，没经过大风浪。
自从发了这个帖后，真正像一句歌词所说，“一天看几回，希望花开早”。
但是理睬我的人，只有一位。
于是我下定决心，自力更生，排除万难，去争取胜利。
这个东东不是显酸性，而且稀溶液PH值在2-3之间吗？算它PKa也在这附近，那么流动相的PH值要达到PKa+2，就得在2以下了，应该超出C18柱的适用范围。
一转念，大家不是说流动相PH值控制在PKa±2以外，化合物就能以一种形态存在，既然PKa+2不行，那么可以控制PH值PKa-2啊，即PH值是6-7之间，不知行不？上次单纯加三乙胺的试验，PH值也是在7左右，不是不行吗？也许缓冲溶液效果要好点，如果单纯加碱行的话，怎么会有那么多需要用到缓冲溶液的地方呢，肯定缓冲溶液有独特的效果的。于是决定配点PH值6.5的缓冲溶液试试。查了点资料，配了25mmol/LK2HPO4溶液，加磷酸、氢氧化钠调节，在酸度计的指示下，配制成功。然后按甲醇30缓冲盐70配制成流动相，上机。
嗯，结果很快出来了，嘿，峰是只有一个了，而且尖尖窄窄的，很好看。但是，问题又来了，出峰时间太快了，2.8分钟。于是，就配了个甲醇20缓冲盐80的流动相，再上机，2.8多点，2.9都不到，效果不明显。我们机器比较差劲的，没梯度洗脱的。试来试去，试了五六针，出峰时间不但没后推，却产生了一个新的问题，出的峰越来越拖尾了。
唉，今天算了，再查查资料吧。于是，拿甲醇10水90的流动相洗柱子，洗了约半小时，一个主任拿来一个样，叫我帮他打一下。这是一个打得很熟的样，流动相也现成。
柱子在甲醇10水90的流动相下洗了半小时，也应该差不多了吧，我想，于是换上这个样的流动相，这是一个不需缓冲盐的，甲醇50水50，我想这个流动相水的比例也蛮高的，也可洗掉缓冲盐的，走了又有30分钟左右，应该差不多，可以进样了吧，打开检测器、工作站，按下开始看看基线。
接下来的景象，把我惊呆了。哪里有什么基线，全是狂峰巨浪，一浪高过一浪，真正是“惊涛拍岸，卷起千堆雪”啊。那个峰一会儿高耸云霄，一会儿直抵深谷。
怎么办？？？柱子报废了？要卷铺盖了？要知道打硫酸盐这个样是我闹着玩的，单位并不要求打，这下出这样一个漏，报废了柱子，难到不引咎……，不敢想象，脸都吓青了。
唉，不管怎样，也要博一下，先缓住他们吧，这里再洗洗看，柱子不会这么不经用吧，缓冲盐大家都在用的，浓度也不是很高，有的书上５0mmol/L都有，我才25mmol/L，PH值是用酸度计测的，也应该可靠，没有越轨行为呀，柱子难道就这样坏了？不可能吧？怀着忐忑的心情，那边跟他说，现在很忙的，结果要晚点才出来，这边看着工作站的图谱，还是一浪一浪的，心都提到嗓子眼了。渐渐地，渐渐地，峰小了，浪静了。一个半小时后，峰平浪静，湖面平静得像一面镜子，基线平得像…像…像什么呢，反正很平很平了，心情也很平很平了，卷起的铺盖重新铺上了，接下来，进送来的样，也轻松搞定了。
陆游说：“纸上得来终觉浅，绝知此事要躬行”。有首歌唱道：“不经历风雨，怎么见彩虹……”。
苯胺硫酸盐到底应该怎么打，还没搞定，东查西查，觉得在PH值6.5的基础上再加点十二烷基磺酸钠，延迟出峰时间，应该有用的。我准备试试，各位大侠给我点忠告吧！！！

作者: 04906 时间: 2016-1-29 16:20

25mm也不低了的，但是也不至于让柱子坏掉，50甲醇50水，你确定流动相配好后超声静置一段时间再用的吗，甲醇和水混合会放热并产生气泡，所以容易把气泡引入柱子中，造成基线波动，要是进入检测器容易造成结果不准确。有时候做不出来不一定都是方法的问题，也有可能是柱子的问题，也许需要封尾更好的C18柱才能分开并且有好的谱图。

作者: 33号 时间: 2016-1-29 16:21

QUOTE:

原帖由 ALALA 于 2016-1-29 16:19 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
对苯二胺硫酸盐、间苯二胺硫酸盐、邻苯二胺硫酸盐，我想他们应该都是强酸性离子化合物，在酸性条件下以对苯二胺，间苯二胺，邻苯二胺形式存在。C-18可以做的，你讲的出两个峰是不是指有两个重叠了?把有机相配比调一下试试呢！
...

我可能说错了，PH值偏碱性，盐才有可能以胺的形式存在。正如你说用离子对分析弱碱的方法值得一试！
我曾用甲醇：水：氨水（高氯酸PH调至6-7）试过二异丙胺盐，这样做不就是测的二异丙胺嘛！你也可以把铵盐合苯二胺做个对照看看！

作者: bbc 时间: 2016-1-29 16:21

先谢谢了
甲醇和水混合会放热，我感觉到了，但它的危害性我还不太了解，嗯，学了一手。乙腈跟水混合好像吸热。
色谱空闲的时候，再试试。

作者: bbc 时间: 2016-1-29 16:22

先谢谢了
甲醇和水混合会放热，我感觉到了，但它的危害性我还不太了解，嗯，学了一手。乙腈跟水混合好像吸热。
色谱空闲的时候，再试试。

作者: 耗子=== 时间: 2016-1-29 16:24

乙腈跟水混合好像吸热。

============================

这个，是的
溶液混合了，要注意超声的

作者: 3.14 时间: 2016-1-29 16:25

我和你一样，也在为这类物质的测试方法费神，不知道你最近有无进展。

作者: 3.14 时间: 2016-1-29 16:26

我想说你尝试的十二烷基磺酸钠，一定要冲洗干净，这个很难洗的，浓度尽量低点，不要超过25mmol。

作者: 3.14 时间: 2016-1-29 16:26

一直比较忙。
这个项目不是单位里要求做的，只是想尽快提高自己而已。
理论上，我想按这个思路去做，应该可以的。
不知你在做什么成分，不妨发出来，大家共勉。

作者: 45778 时间: 2016-1-29 16:27

晕！
前几天，换了根岛津 VP-ODS C18 150mm＊4.6mm的柱子，打对苯二胺硫酸盐，容易的很嘛！
流动相甲醇、水50:50，用磷酸调了一下ph值，出峰就很好的了！流量1ml/min出峰太快，然后
调了几次，调到0.4ml/min时，就很好了。
我想除了柱子的因素外，跟气温也有一定的关系，8月份气温高，样品容易氧化变质，所以得不到重现性好的谱图.
这几天，强冷空气，样品稳定性好。

欢迎光临分析测试百科 (http://bbs.antpedia.com/)