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标题: 【求助】求抑菌圈实验指导 [打印本页]

作者: bananapeople 时间: 2016-2-17 11:05 标题: 【求助】求抑菌圈实验指导

做了快一个半月的抑菌实验，抑菌圈还是做不出来，求指导…拜托拜托…

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作者: 45778 时间: 2016-2-17 11:05

你做的是什么？首先你的药液不能高压灭菌，浓缩就可以了！大肠杆菌枯草芽孢杆菌金黄色葡萄球菌多做了么？

作者: bananapeople 时间: 2016-2-17 11:05

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你做的是什么？首先你的药液不能高压灭菌，浓缩就可以了！大肠杆菌枯草芽孢杆菌金黄色葡萄球菌多做了么？

都做了…呜呜做不出呀

作者: seagate 时间: 2016-2-17 11:05

指示菌浓度太高了，你看看你的图上，好象是有圈的

作者: ALALA 时间: 2016-2-17 11:06

看你这个结果是没有抑菌效果的，不知道你需要什么样的帮助。你确定你测试的东西有抗菌活性么？可以用个抗生素稀释后作为阳性对照，如果实在不放心。

作者: bling 时间: 2016-2-17 11:06

没有抑菌效果，只看到杯内物扩散到培养基中的影印。

作者: bananapeople 时间: 2016-2-17 11:06

看你这个结果是没有抑菌效果的，不知道你需要什么样的帮助。你确定你测试的东西有抗菌活性么？可以用个抗生素稀释后作为阳性对照，如果实在不放心。

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有抑菌作用的，我师姐做出来了…但是我不知道我是哪里错了，是操作错误吗？

作者: ujne 时间: 2016-2-17 11:07

药液是什么？

作者: join 时间: 2016-2-17 11:07

你培养的是什么菌？涂布还是混匀？打洞还是滤纸片还是牛津杯？药液用的什么溶剂？什么浓度下有如图表现？阳性对照什么表现？这些问题你什么都不说清楚，就一句话求指导，无从下手啊。

作者: bananapeople 时间: 2016-2-17 11:07

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你培养的是什么菌？涂布还是混匀？打洞还是滤纸片还是牛津杯？药液用的什么溶剂？什么浓度下有如图表现？阳性对照什么表现？这些问题你什么都不说清楚，就一句话求指导，无从下手啊。 ...

你培养的是什么菌？涂布还是混匀？打洞还是滤纸片还是牛津杯？药液用的什么溶剂？什么浓度下有如图表现？阳性对照什么表现？这些问题你什么都不说清楚，就一句话求指导，无从下手啊。
我培养的是植物乳杆菌，我的致病菌是金葡，是用的混匀的方法，用的牛津杯，把牛津杯放在第一层不含菌液，再到第二层含菌液的，因为我开始直接把牛津杯放在第二层上面杯里面会有菌，所以牛津杯现在是埋在第二层里面，药液是发酵了20h的植物乳杆菌，调ph到7再加过氧化氢酶终浓度是10mg/ml，再过0.22微的滤膜除菌，再打150微到牛津杯中，致病菌第一层倒3分之1不含菌液，第二层100ml含5ml的致病菌接种量倒3分之1，没有阳性对照，我已经做了不同温度，不同ph的，结果都不好…求指导

作者: zhenxin 时间: 2016-2-17 11:09

指示菌浓度太高了，你看看你的图上，好象是有圈的

作者: bananapeople 时间: 2016-2-17 11:10

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指示菌浓度太高了，你看看你的图上，好象是有圈的

浓度太高的话应该圈更大吧

作者: seagate 时间: 2016-2-17 11:10

我以前做这个的时候，有几次实验现象跟你的一样，我认为没有抑菌性，我导师说那个不透明的圈就是抑菌圈…后来我就按照没有抑菌性处理了

作者: bananapeople 时间: 2016-2-17 11:10

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我以前做这个的时候，有几次实验现象跟你的一样，我认为没有抑菌性，我导师说那个不透明的圈就是抑菌圈…后来我就按照没有抑菌性处理了

呃～可它确实是有抑菌作用的哈！我始终觉得是我自己的错误！所以我也不知道该怎么办

作者: bhka 时间: 2016-2-17 11:11

浓度太高的话应该圈更大吧
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指示菌高，有弱的作用显示不出来啊

作者: bananapeople 时间: 2016-2-17 11:11

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浓度太高的话应该圈更大吧
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指示菌高，有弱的作用显示不出来啊

哦哦，懂你的意思，那大概怎么办呢？是不是涂布呢？

作者: bananapeople 时间: 2016-2-17 11:11

或者说大概个多大的指示菌接种量呢？

作者: bhka 时间: 2016-2-17 11:12

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或者说大概个多大的指示菌接种量呢？

不用啊指示菌少加一点就行，用接种环挑一点就行了

作者: bananapeople 时间: 2016-2-17 11:12

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不用啊指示菌少加一点就行，用接种环挑一点就行了

因为我之前都是用的液体培养基在转接到固体培养基在它用手可以我握住的情况下，那用接种环是不是用斜面，还有就是他会不会长不好呀，菌太少的话

作者: bhka 时间: 2016-2-17 11:12

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因为我之前都是用的液体培养基在转接到固体培养基在它用手可以我握住的情况下，那用接种环是不是用斜面，还有就是他会不会长不好呀，菌太少的话 ...

我都是在平板上挑菌，可以的，致病菌很泼辣

作者: bananapeople 时间: 2016-2-17 11:13

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我都是在平板上挑菌，可以的，致病菌很泼辣

那我是不是要在斜面上挑菌呢？那挑一环在100ml的固体培养基里面可以吗打50微的乳酸菌在把牛津杯拔掉的孔里？

作者: taoshengyijiu 时间: 2016-2-17 11:13

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那我是不是要在斜面上挑菌呢？那挑一环在100ml的固体培养基里面可以吗打50微的乳酸菌在把牛津杯拔掉的孔里？

太多了，挑一点溶解在1ml生理盐水里在100ml培养基里加200微升就够了

作者: 12xunmei 时间: 2016-2-17 11:14

你培养的是什么菌？涂布还是混匀？打洞还是滤纸片还是牛津杯？药液用的什么溶剂？什么浓度下有如图表现？阳性对照什么表现？这些问题你什么都不说清楚，就一句话求指导，无从下手啊。
我培养的是植物乳杆菌，我的致 ...

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为什么没有抑菌圈不好说，但是你的做法确实有问题，根据中国药典，对抗生素的检测方法，牛津杯是放在第二层的。

作者: bananapeople 时间: 2016-2-17 11:14

太多了，挑一点溶解在1ml生理盐水里在100ml培养基里加200微升就够了...

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请问用抗生素怎么做阳性对照呢？

作者: taoshengyijiu 时间: 2016-2-17 11:14

请问用抗生素怎么做阳性对照呢？
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纸片就行啊

作者: bananapeople 时间: 2016-2-17 11:15

为什么没有抑菌圈不好说，但是你的做法确实有问题，根据中国药典，对抗生素的检测方法，牛津杯是放在第二层的。...

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最新做完的，我真的很奇怪我的牛津杯里面怎么会有菌，我过了滤膜的。

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作者: seagate 时间: 2016-2-17 11:15

做阳性对照吧，或者你用纸片泡一夜，贴上面试试。比如一个板上，你可以用3个牛津杯，一个加阳性对照，就是一线或二线药物，2个加你的样品，浓度高的和浓度一般的。还有一个放纸片，泡阳性对照药，试试，这样一个板就可以分析

作者: summerxx 时间: 2016-2-17 11:15

我做过指示菌浓度不能过高一般10的6次方 28度培养过夜注意随时观察上清一般要让琼脂吸收完毕才培养植物乳杆菌素抑菌效果一般不是很好最好冷冻干燥浓缩再使用

作者: bananapeople 时间: 2016-2-17 11:16

我做过指示菌浓度不能过高一般10的6次方 28度培养过夜注意随时观察上清一般要让琼脂吸收完毕才培养植物乳杆菌素抑菌效果一般不是很好最好冷冻干燥浓缩再使用
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植物乳杆菌的细菌素不好做？

作者: qhyu 时间: 2016-2-17 11:16

两个原因，植物乳杆菌发酵有问题，抗菌物质产生的少；再就是致病菌的浓度有点大。

作者: bananapeople 时间: 2016-2-17 11:17

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原帖由 qhyu 于 2016-2-17 11:16 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
两个原因，植物乳杆菌发酵有问题，抗菌物质产生的少；再就是致病菌的浓度有点大。

我最近做了，我在想100ml培养基加400微的致病菌还高吗？那我做标曲可以用链霉素吗？

作者: join 时间: 2016-2-17 11:17

菌浓度略大，药浓度略小或计算不对

作者: bananapeople 时间: 2016-2-17 11:17

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菌浓度略大，药浓度略小或计算不对

100ml的培养基加400微的致病菌应该不大了吧，可还是做不出来！

作者: xuuuu 时间: 2016-2-17 11:18

你培养的是什么菌？涂布还是混匀？打洞还是滤纸片还是牛津杯？药液用的什么溶剂？什么浓度下有如图表现？阳性对照什么表现？这些问题你什么都不说清楚，就一句话求指导，无从下手啊。
我培养的是植物乳杆菌，我的致 ...

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我用的牛津杯双层法，和你的方法很像，是嗜热链球菌。我的试验，对大肠杆菌抑制明显，但对沙门作用一般，金葡还没做过

作者: caihong 时间: 2016-2-17 11:18

这个是对大肠的抑制

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作者: SO2 时间: 2016-2-17 11:18

明确抗菌活性，其次将抗菌剂调节不同的浓度的看看，还有你是做抑菌试验是什么抗什么，这个需要说清楚，大家才好出主意呢

作者: bananapeople 时间: 2016-2-17 11:19

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明确抗菌活性，其次将抗菌剂调节不同的浓度的看看，还有你是做抑菌试验是什么抗什么，这个需要说清楚，大家才好出主意呢

我做的是植物乳杆菌抗金葡！

作者: 12xunmei 时间: 2016-2-17 11:19

平板上涂布的菌浓度太大了。。。。。。做个梯度稀释试试？指示菌浓度选好了做出来会非常漂亮的。

作者: finger 时间: 2016-2-17 11:19

用的碟片法吗？

作者: vtongli 时间: 2016-2-17 11:20

你确定你的东西有抑菌作用？从结果看是没得

作者: bananapeople 时间: 2016-2-17 11:20

第一个图是我昨天做的实验，同我那些蛋白酶K处理和胃蛋白酶等处理出现的图，知道怎么回事，第二个图是我之前做的好的，我不知道是不是外面的菌没处理掉，所以染菌，但是我用那种进口的minipo的滤膜处理了的，结果成这样子了！

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作者: xiaoxiaoniao 时间: 2016-2-17 11:21

你师姐做的时候有抗菌活性，你跟你师姐用的抗菌药物是同时制备出来的吗？还是你自己制备的，首先要确定药物有没有问题

作者: join 时间: 2016-2-17 11:21

这个图，不知道怎么指导了，有抑菌活性！

作者: bananapeople 时间: 2016-2-17 11:21

这个图，不知道怎么指导了，有抑菌活性！

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但是染菌啦！

作者: sunbent 时间: 2016-2-17 11:22

看得出来是有圈的，，，但是指示菌浓度太大，，，

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