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标题: 【求助】想利用三重四级杆定量里面的小分子生物碱类成分 [打印本页]

作者: qinqinai 时间: 2016-3-14 12:53 标题: 【求助】想利用三重四级杆定量里面的小分子生物碱类成分

请教大家，我的样品共100ul,有三百多个这样的样品，其中含有大量的不挥发性无机盐，想利用三重四级杆定量里面的小分子生物碱类成分，如何将盐类除掉不影响质谱的检测得到好的数据呢？谢谢大家。

作者: xiaoxiaojinglin 时间: 2016-3-14 12:53 标题: 【回复】

可以用固相萃取小柱，把每个样品过一遍

作者: aaby 时间: 2016-3-14 12:53 标题: 【回复】

样品数目太多了，而且过柱子会不会损失太大呀

作者: p1900 时间: 2016-3-14 12:54 标题: 【回复】

盐是没有保留的，可以把刚从色谱柱洗脱的部分切换到废液中不进质谱，等快到所测成分的保留时间时再切换进质谱，我们这样进过几千个培养液样品都没问题。不过如果样品的保留时间较短的话盐可能会影响药物的峰形，如果不能接受的话可以考虑梯度会改善一些

作者: 886爱 时间: 2016-3-14 12:54 标题: 【回复】

可以告诉我大概盐在多长时间能除干净吗？有没有具体的实例说一下来参考？

作者: PP熊 时间: 2016-3-14 12:54 标题: 【回复】

我测得时候在所用的色谱柱及流速下T0为0.7min左右，我把1min前的流动相都切换到废液了，每个batch一百多个样品都没有问题

作者: n111 时间: 2016-3-14 12:55 标题: 【回复】

想请教一下，您的样品中盐多不多呢，我的是HBSS缓冲盐溶液，盐非常多，我已经把样品冻干，想在进样的时候用甲醇流动相溶解有效成分并除去盐分，这样做有必要吗？还是直接进样就可以呢？
如果不用上述步骤，色谱柱的使用在我的实验中主要的目的就是除去盐分，是不是可以选择很短的柱子以便节省进样时间，您有没有这方面的经验，样品走梯度好还是等度好呢？

作者: xiaoxiaojinglin 时间: 2016-3-14 12:55 标题: 【回复】

我的多数样品都是0.1 M的PBS，有时是DMEM培养基，没有冻干，直接加2倍体积的乙腈，涡旋离心取上清进样。用纯甲醇复溶可以去除盐分，但是使用短柱子的时候会导致色谱峰非常宽，有时甚至产生肩峰甚至双峰。柱子可以选尽可能短的，我用过5cm的快速分离柱。梯度很费时间，如果等度的峰形、精密度什么的还可以的话就不要用梯度了

作者: 大花猫bb 时间: 2016-3-14 12:56 标题: 【回复】

多谢您指教，我没有做过三重四级杆，所以不是很懂，你也是用的质谱定量吗？你说的峰宽和肩峰是HPLC还是质谱的离子流图？这种峰产生的原因是溶解样品没有使用流动相的原因吗？想和你交流一下，如果仅仅使用1cm的预柱会不会更好一些呢？

作者: 妮子@ 时间: 2016-3-14 12:56 标题: 【回复】

我用的三重四级杆测得，肩峰是色谱图上的，跟用什么检测器无关，是没用流动相溶解样品溶剂扩散导致的。不建议仅使用1cm的预柱，因为生物样品中除了盐含还有其它成分，容易对质谱测定产生基质效应

作者: 小妖精@ 时间: 2016-3-14 12:56 标题: 【回复】

前辈你好，我也遇到了和你一样的情况，请问你的问题具体怎么解决的，真的过柱子了么？
还是就是用甲醇提取了，谢谢咯

作者: 大大 时间: 2016-3-14 12:57 标题: 【回复】

你好，我现在要用HBSS缓冲液，请问你那你的盐怎么除掉的

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