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标题: 【转载】求高手指教：如何获取一系列欠焦高分辨？ [打印本页]

作者: nsdm 时间: 2016-4-8 10:10 标题: 【转载】求高手指教：如何获取一系列欠焦高分辨？

我们实验室用的是JEM2010透射电子显微镜，（点分辨率2.3nm，信息分辨率1.4nm，球差1mm，谢尔策欠焦值为-61nm。）配有Gatan 794CCD（1k*1k）。现在想在谢尔策欠焦附近获取一系列欠焦高分辨照片，不知道如何操作，尤其是Gatan软件的设置，手动调焦获取和程序调教的方法，请各位老师帮忙指教。

作者: 小黄 时间: 2016-4-8 10:10

使用物镜聚焦微调来调整就行
2100是集成到电脑屏幕上的，可以通过软件上的defocus值来判断，由于2010用的是小屏幕，不知道能不能直接观察

作者: nsdm 时间: 2016-4-8 10:11 标题: 回复 #2 小黄的帖子

是不是调小屏幕上的focus?可是focus在高分辨最清晰时候的值相差太远，有时候真有时候还是负的，有时候在谢尔策欠焦时图像根本不清楚，是什么原因？

作者: 夜蓝星 时间: 2016-4-8 10:11

做这种事情最基本的一条，要先校正那个显示的离焦值。那个显示值通常都不太准。

作者: nsdm 时间: 2016-4-8 10:12 标题: 回复 #4 夜蓝星的帖子

请问是校正小屏幕的focus还是DV值？怎么校正？

作者: 小熊猫 时间: 2016-4-8 10:12

在DM里有个Acquire Series的功能，可以拍系列像，但是离焦值需要自己手动改变。你要做什么？出射波函数重构？

作者: 小熊猫 时间: 2016-4-8 10:12 标题: 回复 #5 nsdm 的帖子

较Focus值，DV是一般是用来设标准物镜电流值的。另外，小屏幕上显示的focus值基本上没有什么实际的参考价值，一般校正的话都是校正Focus step。

作者: nsdm 时间: 2016-4-8 10:13 标题: 回复 #7 小熊猫的帖子

我想做出射波函数重构，那就是可以先不管DV值，只是校正focus？校正Focus step是不是以一个固定的步长手动调节focus的意思？

作者: 小熊猫 时间: 2016-4-8 10:14 标题: 回复 #8 nsdm 的帖子

也不是不管DV值，做高分辨的时候一般都希望DV为零，因此在粗聚焦图像的时候都是通过调整样品的高度聚焦，只有在最后细聚焦的时候才会改变Focus。Focus值不用校正，小屏幕上显示的Focus值根本就不准，没有什么实际意义。校正Focus Step就是说我改变Focus一个固定值对应真正的物镜焦距的变化。

作者: nsdm 时间: 2016-4-8 10:15 标题: 回复 #9 小熊猫的帖子

好的，多谢老师，我试试

作者: longquan 时间: 2016-4-8 10:16 标题: 回复 #9 小熊猫的帖子

我还是很好奇这个Focus step到底是怎么校正的？

作者: 夜蓝星 时间: 2016-4-8 10:16

可以用非晶碳膜，根据FFT算出实际离焦量。

作者: longquan 时间: 2016-4-8 10:17 标题: 回复 #12 夜蓝星的帖子

哦，这个准不准？要是Cs不知道管用不？

作者: 夜蓝星 时间: 2016-4-8 10:17

Cs也是同时可以算出来的。至于准不准就难说了，这是个测Cs的常用方法。

作者: longquan 时间: 2016-4-8 10:17

如果Cs和defocus 都不知道，不知道至少需要几张才能完全把两个都确定。

作者: 大学习 时间: 2016-4-8 10:18

Willims and Carter 的书第二版第553 \554\555 讲得蛮详细的.

作者: ayanyang 时间: 2016-4-8 10:18

我也是刚开始做高分辨。想问一下，怎么才能准确确定什么时候是in focus呢？光看minimum contrast误差很大啊。

作者: momom 时间: 2016-4-8 10:19

学习中，期待更好的答案！

作者: 小熊猫 时间: 2016-4-8 10:19 标题: 回复 #17 ayanyang 的帖子

不能准确确定，一般都是认为零衬度是正聚焦。

作者: ayanyang 时间: 2016-4-8 10:20 标题: 回复 #19 小熊猫的帖子

多谢回复！那如果到时候要做simulation，如何和实验图像对比？就是比如我模拟zero defocus的图像，但实验图像又不能准确得知是否正聚焦，怎么比对呢？

作者: 小熊猫 时间: 2016-4-8 10:21

如果要做模拟都是要拍系列离焦像，然后跟系列离焦和系列厚度的模拟像去比对。比如说，你想做高斯离焦像，你可以在做实验时，在零衬度像的周围拍摄多张不同离焦值的像，两张像之间的离焦步长要比较小，然后用计算的不同厚度的高斯离焦像跟这些实验像去比对。

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