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标题: 【求助】请问RNA抽提后存放在-80度冰箱中至少可以存放多久 [打印本页]

作者: 土坷垃 时间: 2016-4-8 14:34 标题: 【求助】请问RNA抽提后存放在-80度冰箱中至少可以存放多久

请问RNA抽提后存放在-80度冰箱中至少可以存放多久？
还有RT-PCR中引物如果是灭菌水,而不是DEPC水配置,RT一定失败吗?

作者: vvmmoy 时间: 2016-4-8 14:35

可以放1年左右
应该用DEPC水溶，灭菌水效果肯定不会好。

作者: 土坷垃 时间: 2016-4-8 14:35

我的目的基因可能是比较低丰度表达怎么办?

作者: TAT 时间: 2016-4-8 14:35

楼主,虽然RNA可以保存，但是不推荐,因为RNA易降解.
可以考虑,逆转录之后，保存。

作者: 土坷垃 时间: 2016-4-8 14:36

我这是没办法啊
因为第一RT可能用了一般的灭菌的MILIQ水配置的引物,
逆转录后,PCR扩增连内参都没有,
逆转录后cDNA含量为0.9~1.5ug/ul
现在不知道怎么办呢:(

作者: 土坷垃 时间: 2016-4-8 14:41

我这是没办法啊

作者: BUK 时间: 2016-4-8 14:42

QUOTE:

原帖由 土坷垃 于 2016-4-8 14:41 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

我这是没办法啊

不会是引物问题,你的RNA 质量高么?如果连内参都没有,要么是你PCR是操作失误,要么是RNA-cDNA步骤有问题,

作者: 土坷垃 时间: 2016-4-8 14:42

现在已经查明是试剂原因,新买TAQ和DNTP,BUFFER

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