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标题: 【求助】LC3、beclin1和p62引物 [打印本页]

作者: fei1226com 时间: 2016-4-9 10:23 标题: 【求助】LC3、beclin1和p62引物

小弟最近要做自噬。。。。看了点文献，就是没找到LC3的引物，求助各位师兄、师姐，有人用过LC3引物么，希望大家不吝赐教，还有如果有人用过beclin1和p62的引物希望也能告诉小弟下，万分感谢，刚开始做实验啥都不懂。。。。

作者: yjf1026 时间: 2016-4-9 10:24

为什么要用LC3、p62的引物？你想通过PCR检测自噬？

作者: fei1226com 时间: 2016-4-9 10:24

后来换了，我换成LC3和beclin-1了，引物已经设计好了，但是我跑电泳LC3怎么也跑不出来。。。一点进展都没有，beclin 1出的也很浅，但是用15%的分离胶，转膜条件300MA，120v,70min，1抗用的CST的LC3A/B,但是LC3一点都没出，beclin 1出的一般，抗体浓度都是1：500，师求大大，有什么建议么。。。真的好头疼

作者: fei1226com 时间: 2016-4-9 10:24

QUOTE:

原帖由 yjf1026 于 2016-4-9 10:24 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
为什么要用LC3、p62的引物？你想通过PCR检测自噬？

后来换了，我换成LC3和beclin-1了，引物已经设计好了，但是我跑电泳LC3怎么也跑不出来。。。一点进展都没有，beclin 1出的也很浅，但是用15%的分离胶，转膜条件300MA，120v,70min，1抗用的CST的LC3A/B,但是LC3一点都没出，beclin 1出的一般，抗体浓度都是1：500，师求大大，有什么建议么。。。真的好头疼

作者: viviwang1987 时间: 2016-4-9 10:25

一抗不是有好几种类型吗？请问LC3A/B LC3A，LC3B有什么区别吗，做不出来条带或者条带的多少会不会与这几个型号有关系

作者: fei1226com 时间: 2016-4-9 10:25

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原帖由 viviwang1987 于 2016-4-9 10:25 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

一抗不是有好几种类型吗？请问LC3A/B LC3A，LC3B有什么区别吗，做不出来条带或者条带的多少会不会与这几个型号有关系

这个区别还真不知道，我送出去做能做出来。。。还是我的实验方法的问题

作者: 8princess8 时间: 2016-4-9 10:25

求lc3的引物，我也在做自噬，非常感谢

作者: kswl870 时间: 2016-4-9 10:26

后来换了，我换成LC3和beclin-1了，引物已经设计好了，但是我跑电泳LC3怎么也跑不出来。。。一点进展都没有，beclin 1出的也很浅，但是用15%的分离胶，转膜条件300MA，120v,70min，1抗用的CST的LC3A/B,但是LC3一点都没出，beclin 1出的一般，抗体浓度都是1：500，师求大大，有什么建议么。。。真的好头

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我用的是sigma的LC3B的一抗，1：1000，12%的分离胶，湿传300MA，30或40min，能出来比较明显的两条带

作者: shenkunjie 时间: 2016-4-9 10:26

自噬是一个动态的过程，从mRNA水平检测这些分子可能不能代表蛋白的变化及自噬的过程
个人意见，仅供参考

作者: 1472583690 时间: 2016-4-9 10:26

求LC3引物！顺便还想请教LC3A和LC3B的区别

作者: boom 时间: 2016-4-9 10:27

小弟也在做自噬，求助人beclin1全长编码区引物和扩增条

作者: yhtfyl 时间: 2023-2-24 07:34

感谢楼主分享，受教了

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