1、抗体分子的异质性与电荷变异
抗体分子作为复杂的四聚体糖蛋白，具有质量不均一的特点，即“异质性"。异质性可能来自于抗体分子复杂的生物合成途径，（如细胞系及培养工艺影响糖基化）也可能来于纯化，制剂工艺中产生降解或聚体。
这种异质性也可以宏观表现为：在等电聚焦电泳图上出现弥散或多个条带；离子交换色谱图主峰前后出现小峰。这是由于抗体分子所带电荷差异造成的异质性，所以，这种现象也被称为抗体的电荷变异。
2、抗体电荷变异对其药效学的影响
目前普遍认为抗体电荷变异对其药效学影响并不显著。基因泰克公司曾对上市抗体及临床前抗体药物做过一个总结。得出的结论是：1）当电荷变异超过一个pH单位时，会影响药物的组织分布及药代动力学。2）增加正电荷，会提高药物的组织停滞，降低血液清除。3）降低正电荷，会减少药物的组织停滞，提高药物的全身清除。（Effects of Charge on Antibody Tissue Distribution and Pharmacokinetics ，见附件）
3、影响电荷变异的因素及避免方法
目前的研究发现：多种化学修饰都会引起重组抗体等电点的改变，如：
脱酰胺化、唾液酸化、重链C段赖氨酸清除会造成重组抗体的带正电荷；
赖氨酸/甘氨酸酰胺化反应、甲硫氨酸氧化作用等会造成重组抗体带负电荷[85]。
针对细胞培养环节，提高培养基中Cu2+浓度，降低Zn2+浓度，可以增强重组抗体C端脯氨酸的酰胺化，最终导致重组抗体发生碱性电荷变异。[86] [87]
4、参考文献
[85] Khawli LA, Goswami S, Hutchinson R, et al. Charge variants inigg1: Isolation, characterization, in vitro binding properties and pharmacokinetics in rats. MAbs, 2010, 2(6): 613-624
[86] Kaschak T, Boyd D, Lu F, et al. Characterization of the basiccharge variants of a human igg1: Effect of copper concentration in cell culturemedia. MAbs, 2011, 3(6): 577-583
[87] Luo J, Zhang J, Ren D, et al. Probing of c-terminal lysinevariation in a recombinant monoclonal antibody production using chinese hamsterovary cells with chemically defined media. Biotechnology and bioengineering,2012, 109(9): 2306-2315作者: 9妖9 时间: 2016-4-9 16:05
Chromatographic analysis of the acidic and basic species of recombinant monoclonal antibodies
文献链接：cuturl('http://d.dxy.cn/detail/7386537')作者: 兔唇 时间: 2016-4-9 16:23
1、抗体分子的异质性与电荷变异
抗体分子作为复杂的四聚体糖蛋白，具有质量不均一的特点，即“异质性"。异质性可能来自于抗体分子复杂的生物合成途径，（如细胞系及培养工艺影响糖基化）也可能来于纯化，制剂工艺中产生降解或聚体。
这种异质性也可以宏观表现为：在等电聚焦电泳图上出现弥散或多个条带；离子交换色谱图主峰前后出现小峰。这是由于抗体分子所带电荷差异造成的异质性，所以，这种现象也被称为抗体的电荷变异。
2、抗体电荷变异对其药效学的影响
目前普遍认为抗体电荷变异对其药效学影响并不显著。基因泰克公司曾对上市抗体及临床前抗体药物做过一个总结。得出的结论是：1）当电荷变异超过一个pH单位时，会影响药物的组织分布及药代动力学。2）增加正电荷，会提高药物的组织停滞，降低血液清除。3）降低正电荷，会减少药物的组织停滞，提高药物的全身清除。（Effects of Charge on Antibody Tissue Distribution and Pharmacokinetics ，见附件）
3、影响电荷变异的因素及避免方法
目前的研究发现：多种化学修饰都会引起重组抗体等电点的改变，如：
脱酰胺化、唾液酸化、重链C段赖氨酸清除会造成重组抗体的带正电荷；
赖氨酸/甘氨酸酰胺化反应、甲硫氨酸氧化作用等会造成重组抗体带负电荷[85]。
针对细胞培养环节，提高培养基中Cu2+浓度，降低Zn2+浓度，可以增强重组抗体C端脯氨酸的酰胺化，最终导致重组抗体发生碱性电荷变异。[86] [87]
4、参考文献
[85] Khawli LA, Goswami S, Hutchinson R, et al. Charge variants inigg1: Isolation, characterization, in vitro binding properties and pharmacokinetics in rats. MAbs, 2010, 2(6): 613-624
[86] Kaschak T, Boyd D, Lu F, et al. Characterization of the basiccharge variants of a human igg1: Effect of copper concentration in cell culturemedia. MAbs, 2011, 3(6): 577-583
[87] Luo J, Zhang J, Ren D, et al. Probing of c-terminal lysinevariation in a recombinant monoclonal antibody production using chinese hamsterovary cells with chemically defined media. Biotechnology and bioengineering,2012, 109(9): 2306-2315
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有篇文献Physicochemical and Functional Comparability Between the Proposed Biosimilar Rituximab GP2013 and Originator Rituximab 讲利妥昔与其类似的对比中，CEX图谱GP2013有个多余的碱性峰，为脯氨酸酰化，之后通过制备得到高AP化的单抗，做活性研究，PK/PD研究，毒性研究，，过程很复杂，，作者: 8princess8 时间: 2016-4-9 16:38
图片附件: 88682025.jpg (2016-4-9 16:13, 104.44 KB) / 该附件被下载次数 57