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标题: 然后将样品OD值带入标曲计算结果却非常小。 [打印本页]

作者: fantacy    时间: 2016-4-25 21:12     标题: 然后将样品OD值带入标曲计算结果却非常小。

称0.1克的烘干葡萄糖定容到100ML制成储备液,然后精确量取10ml储备液至100ml容量瓶,采用蒸馏水定容至刻度线。再分别取0,0.2,0.4,  0.6,  0.8,   1.0,1.2ml葡萄糖溶液置于25ml具塞试管,并分别加蒸馏水至2ml。最后加入5ml80%硫酸蒽酮溶液。沸水浴15分钟,然后冰水浴15min,取出恢复至室温,并检测。制作标准曲线。然后将样品OD值带入标曲计算结果却非常小。
作者: hey_bye    时间: 2016-4-25 21:13

标准溶液OD值比正常均大一倍,如果将OD值除以2则能完美解决所有问题
作者: 青青子衿    时间: 2016-4-25 21:16

没用硫酸蒽酮法测过,我们实验室都是用硫酸苯酚法测多糖,楼主可以试试这个方法
作者: 兜兜    时间: 2016-4-25 21:20

之前一直使用的苯酚法,也好掌控,但现在要给一个公司出货,别人只认可硫酸蒽酮法做出的检测报告
作者: mr.henry    时间: 2016-4-25 21:23

我用的是硫酸蒽铜法测总糖,苯酚法的苯酚需要重蒸吗
作者: 娜爷~    时间: 2016-4-25 21:27     标题: 回复 #5 mr.henry 的帖子

不用吧,我们都是购买优级纯苯酚,然后直接配置
作者: 小书虫    时间: 2016-4-25 21:30

这个好测么?我咋做工作曲线都没什么线性,苯酚影响很大?么
作者: outeer    时间: 2016-4-25 21:32

苯酚法比较容易掌控,数据也比较稳定,蒽酮法相对来说要显得复杂一点,但掌握之后也能测出非常稳定的数据。
作者: 冰@舟    时间: 2016-4-25 21:36

标准曲线用0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0加蒸馏水至1ml,再加入1ml苯酚(优级纯),再加入优级纯浓硫酸5ml,涡旋振荡均匀,待冷却即可检测,一般来说此方法比较稳定,不容易出现纰漏,不知你测得是什么??
作者: XXXX111    时间: 2016-4-25 21:38

苯酚问题,放置过夜后变化蛮大,重新配了后效果不错




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