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标题: 谁测过谷氨酰胺酶（PG酶）的酶活？ [打印本页]

作者: hey_bye 时间: 2016-4-27 12:51 标题: 谁测过谷氨酰胺酶（PG酶）的酶活？

测过谷氨酰胺酶（PG酶）的酶活？我查了一下，底物溶液需要二肽Cbz-Gln-Gly；请问Cbz-Gln-Gly与Z-Gln-Gly是同一个试剂吗？有没有哪位虫友知道具体该怎样测PG酶的酶活呢？底物又是在哪里买到的？

作者: 青青子衿 时间: 2016-4-27 12:52

我测过，但是不知道要用你提到的试剂。
不行就换个方法吧，我当时用的就挺简单的。

作者: 兜兜 时间: 2016-4-27 12:55

可否给提供具体的测定步骤呢，我也是找了好久，找到一篇是用二肽Cbz-Gln-Gly作为底物溶液，但是又查到那个底物是用来测定TG酶酶活性的，所以现在不确定那个方法对不对了

作者: mr.henry 时间: 2016-4-27 13:00

多聚半乳糖醛酸酶( PG)活性：Amnuaysin等（2012）和Figueroa等（2010）的方法。取2g样品，用6mL酶提取液( 6%NaCl，内含0.6%EDTA，1%PVP) 匀浆然后再10000r/min离心20min，上清液即为粗酶提取液，待用。将酶提取液稀释10倍，取稀释液0.1 mL，加0.5%的果胶溶液( pH 4.0) 1.0 mL，对照为pH 4.0的醋酸缓冲液，37℃恒温反应30min后加入0.9 mL DNS试剂，沸水浴5 min，冷却，加水定容至15 mL，摇匀，540 nm波长处测吸光值以D-( +) 半乳糖醛酸标准溶液作标准曲线，以每分钟每克鲜样37℃时分解果胶产生1 g的游离半乳糖醛酸为1个酶活力单位( U)。

作者: 娜爷~ 时间: 2016-4-27 13:04

咱们两个说的好像不是一个酶，我要测定的是蛋白质谷氨酰胺酶（简称PG酶）的酶活性

作者: 小书虫 时间: 2016-4-27 13:07

谷氨酰胺酶活力检测，是谷氨酰胺变成谷氨酸的那个吗？

作者: outeer 时间: 2016-4-27 13:10

请问您测过吗？可知道具体测定蛋白质谷氨酰胺酶酶活性的方法呢？

作者: 冰@舟 时间: 2016-4-27 13:13

测过，我测的是微生物里面的。其实最精确的方法就是测谷氨酸的生成量。

作者: XXXX111 时间: 2016-4-27 13:18

我也查了一些文献，都是从微生物里面提取纯化之后测定谷氨酰胺酶酶活性，但是他们用的那个底物二肽Cbz-Gln-Gly是测定谷氨酰胺转氨酶酶活性的底物，所以我现在不确定那个方法是否是测定谷氨酰胺酶酶活性的方法了。请问您也是先从微生物里面提取谷氨酰胺酶，又测的酶活性吗？能具体告知您是怎么测的吗？我是食品方向的，就是直接买的PG酶成品，然后用于小麦蛋白中，但是实验需要测定PG酶的酶活性，求指点

作者: 差不多先生 时间: 2016-4-27 13:22

所以买标品一定要去正规的地方买

作者: 差不多先生 时间: 2016-4-27 13:22

做这实验很久之前了，不记得具体方法了，知网上有很多提支链淀粉的文献，可以参考一下，你说的这个情况不知道是不是没有把PH调好，多过几次水可能会好点

作者: chenzhen2016 时间: 2023-8-10 12:24

是的，Cbz-Gln-Gly和Z-Gln-Gly都是用于测定谷氨酰胺酶（PG酶）酶活性的试剂，但它们是不同的试剂。

Cbz-Gln-Gly： Cbz-Gln-Gly，也称为氨基甲酰谷氨酰胺甘氨酸，是一种特定的底物，用于测定谷氨酰胺酶酶活性。它的结构是：Carbobenzyloxy-Gln-Gly。

Z-Gln-Gly： Z-Gln-Gly，也称为氨基羟甲基戊酰谷氨酰胺甘氨酸，是另一种底物，通常用于测定谷氨酰胺酶酶活性。它的结构是：Benzoyl-Gln-Gly。

这两种底物的结构略有不同，所以它们是不同的试剂。

测定PG酶酶活性的方法一般是通过测量底物的降解产物，通常是在pH敏感染料的存在下，底物被酶催化分解，产生颜色或荧光信号。这可以用分光光度计或荧光光度计进行测量。

你可以在一些生化试剂供应商或化学品公司购买这些底物，如Sigma-Aldrich、Merck、Thermo Fisher等。在购买前，最好阅读产品说明书以了解底物的适用范围、储存条件和使用方法。

总之，测定PG酶酶活性需要合适的底物和相关的试剂，最好根据你的实验需求和研究领域选择适合的试剂和方法。如果你在实验中遇到问题，建议咨询你所在实验室的同事、导师或其他相关领域的专家，以获取更具体的指导。

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