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标题: 【求助】新柱子，峰分不开 [打印本页]

作者: SO2 时间: 2016-4-27 15:44 标题: 【求助】新柱子，峰分不开

安捷伦液相色谱，最近使用一根新柱子（GPC 柱子）分析新产品，为什么相邻两个峰分不开？样品浓度或进样量是不是对其有影响？？应该降低还是升高？谢谢！

作者: zzzz 时间: 2016-4-27 15:45

浓度影响是次要的，关键是流动相的问题，需要调整一下流动相各组分的比例或酸碱度

作者: 黄花菜 时间: 2016-4-27 15:45

浓度和进样量有影响的哦，小的浓度或小的进样量往往能获得好的峰形

作者: zzzz 时间: 2016-4-27 15:47

再串联一个GPC柱，或许会好一些。

作者: TNT 时间: 2016-4-27 15:47

调整一下流动相

作者: 555444 时间: 2016-4-27 15:48

请问一下你这是安捷伦什么型号的液相色谱仪，不同型号的有不同的做法。

作者: SO2 时间: 2016-4-27 15:48

非常感谢大家对我的问题关注和回答~~！！需要补充的信息是：
1. 在另外一台同型号（安捷伦 1200LC）液相色谱上，分离条件相同，流动相也相同，得出的峰型就很好，能清晰地分开；
2. 使用的是相同的流动相；即单一流动相四氢呋喃，待测样品的溶剂也是四氢呋喃；
3. 在分离柱之前使用了保护柱；
4. 今天将样品浓度降低为原来的0.5倍，峰还是分不开：（明天准备减小进样量再实验下；

请问，还应向哪些方面考虑？谢谢~~！！

作者: INK 时间: 2016-4-27 15:48

看看色谱图和具体的分析条件为好。

您分析什么样品？

作者: viviwang1987 时间: 2016-4-27 15:49

还是调流动相吧先。不行就换柱子。

作者: 555444 时间: 2016-4-27 15:49

这台仪器正常工作？

能否将两个仪器出来的图帖上，做一下对比？

作者: SO2 时间: 2016-4-27 15:50

这是同一个样品在两台HPLC上的结果，柱子、分离条件等完全一样。不知道峰型为何相差那么多。。。。
是不是结果不好的那台因为柱外死体积过大？怎么解决这个问题呢？？
谢谢~~

作者: 8princess8 时间: 2016-4-27 15:51

是同一根色谱柱么？

可能有死体积不同的问题，代换一下色谱柱前后的连接管路看看。

作者: vvmmoy 时间: 2016-4-27 15:52

对的，尽量接短一点的管子。

作者: 8princess8 时间: 2016-4-27 15:53

检查一下管路连接，特别是柱子连接，小心又死体积

作者: SO2 时间: 2016-4-27 15:53

因为分离柱前用了保护柱，两根柱子是放在上下两层的，在拐弯的地方感觉管线都被折掉了，所以我今天换了长些的管子重新连接在拐弯的地方自然弯曲，出的图还是老样子（同第二张图）。
柱子用PEEK管线连接，需要注意些什么能尽量减小死体积呢？
谢谢！

作者: zbs 时间: 2016-4-27 15:55

管子的内径注意下

作者: nn255 时间: 2016-4-27 15:55

那你是否试过把你旧的色谱柱放到那台不好的仪器上分析一下，然后再看结果，如果还是分不开的话那就是柱子的原因，看你的图，那张好的图分离效果也不是很好，也许你正好买到了稍差一点的色谱柱（每一根色谱柱都是有差异的），也就是说原来的比较好一点，建议你在流动相里加入适当组分的水，让峰的分离度大于1才算好的分离。

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