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标题: 【求助】创新通恒半制备色谱制备问题 [打印本页]

作者: Ao7 时间: 2016-4-27 15:56 标题: 【求助】创新通恒半制备色谱制备问题

LC3000，20的柱子。梯度洗脱多肽，9ml的流速。根据流速和管路的体积计算预留收集的时间，收集样品。－》分析，分析结果和制备前的色谱分析没有多大区别。请各位大侠帮忙分析一下，问题出在哪里了？

作者: memory 时间: 2016-4-27 15:58

算时间收峰还是看着检测器的谱图收峰啊？

能发下制备上的谱图吗？标注一下从哪收到哪。

作者: Ao7 时间: 2016-4-27 15:58

出峰之后，预留收集时间，再收集。

作者: 555444 时间: 2016-4-27 15:58

可以把主峰分为前、中、后分段收集。分别检测

作者: 911 时间: 2016-4-27 16:00

你是液相色谱仪那个型号的。

作者: 555444 时间: 2016-4-27 16:01

流速低了，梯度高了，出峰早了

作者: 831226 时间: 2016-4-27 16:02

我觉得分别收集，分别再检测，是个好办法。

作者: 831226 时间: 2016-4-27 16:04

有什么问题可以直接打电话联系他们应用部门啊，不知你是哪里的客户，他们应用部的电话是010-82782687

作者: ending 时间: 2016-4-27 16:04

可能是产品有问题吧。

作者: 小荷尖尖 时间: 2016-5-3 10:51

在这里顺便问下，开始做一个新样品，柱子拿甲醇冲洗了半天，可今天进样基线还是不稳的厉害呢？柱子做这个是合适的。是不是柱子又出啥问题了？图片点击可在新窗口打开查看

作者: u234 时间: 2016-5-3 10:51

楼上，你的柱子是安捷伦气相色谱仪色谱柱的哪个型号的，柱子应该没什么问题，可能是其他方面的问题。

作者: bluelake 时间: 2016-5-3 10:52

首先把一些人为操作上的问题排除了：流动相脱气了没有？管路中是否有气泡？仪器是否有接地？上次试验后是否冲洗干净？等等
不是以上问题引起的话就要考虑柱子是否损坏了

作者: 831226 时间: 2016-5-3 10:52

我的是ZORBAX SB C18

作者: 831226 时间: 2016-5-3 10:52

QUOTE:

原帖由 bluelake 于 2016-5-3 10:52 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
首先把一些人为操作上的问题排除了：流动相脱气了没有？管路中是否有气泡？仪器是否有接地？上次试验后是否冲洗干净？等等
不是以上问题引起的话就要考虑柱子是否损坏了
...

流动相脱过气了，管路没有气泡，上次试验后也冲洗了大半天，我的柱压也正常，就是不知道怎么了？

作者: ALALA 时间: 2016-5-3 10:53

你可以考察一下流动相的配比是否合适，我刚刚经历了一次，所有原因都排查了，工程师也请上门了，还是没解决问题，最后无意间发现时水相和有机相的配比不合适，换个比例基线立马直的和一根直线似的

作者: 耗子=== 时间: 2016-5-3 10:53

压力有什么变化没有？
看看溶剂滤头有没有堵塞，或者是有漏液

作者: nn255 时间: 2016-5-3 10:55

QUOTE:

原帖由 耗子=== 于 2016-5-3 10:53 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
压力有什么变化没有？
看看溶剂滤头有没有堵塞，或者是有漏液

我的流动相是90%水和10%乙腈，压力基本没变，滤头没塞，也不漏液，我现在担心是不是柱子坏了？但用纯甲醇冲洗又是一条很直很直的线，不懂了！

作者: iii_ii 时间: 2016-5-3 11:00

给你个方案：这个方法压基线我百试百灵。

先用纯乙腈冲30分钟，然后在30钟内以梯度变到90%水和10%乙腈，冲30分钟，然后再以梯度变到10%水和90%乙腈.

作者: gogo 时间: 2016-5-3 11:01

看看具体的色谱条件和色谱图如何？
波长多少？有没有梯度？

作者: 66+77 时间: 2016-5-3 11:02

附图了，检测波长210，流速1.0ml/min,柱温35度，水和乙腈比例为90：10。没有梯度。大家看看为什么做完上一个样品后柱子变换条件，再重新进样就成这样了。

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