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标题: 【求助】10nm以上的纳米金 [打印本页]

作者: 青青草 时间: 2016-5-2 10:17 标题: 【求助】10nm以上的纳米金

10nm以上的纳米金上能否直接连上蛋白?谢谢了,我每次做都聚集了,用什么办法可以阻止聚集呢?谢谢大家了

作者: xiaoxiaojinglin 时间: 2016-5-2 10:17 标题: 【回复】

能够直接连接到蛋白上
但是要注意两个关键问题：
1 纳米金溶液的ph值必须要等于或者略高于蛋白质的等电点
2 蛋白质的浓度要稍高于所需的蛋白量不足的蛋白量要用BSA补充
纳米金与蛋白的这种连接依靠的是静电吸附以上两个条件直接影响吸附效果
只要两个条件满足纳米金是不会发生聚合的即使向里面加较高浓度的氯化钠

作者: p1900 时间: 2016-5-2 10:18 标题: 【回复】

应该是先将金颗粒修饰一下吧

作者: efp 时间: 2016-5-2 10:18 标题: 【回复】

楼主可以查查文献好像清华的有位教授做的不错感觉和你的比较类似

作者: mimima 时间: 2016-5-2 10:19 标题: 【回复】

我觉得静电吸附是一种，其他方式还有很多，比如edc偶联得方式等等，找个综述看一下就明白了

作者: xiaoxiaoai 时间: 2016-5-2 10:19 标题: 【回复】

胶体金是一种常用的标记技术，有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。同时在流式、电镜、免疫、分子生物学以至生物芯片中都可能例用到。
　 1971年Faulk 和Taytor将胶体金引人免疫化学，此后免疫胶体金技术作为一种新的免疫学方法，在生物医学各领域得到了日益广泛的应用。目前在医学检验中的应用主要是免疫层析法( immunochromatogra-phy)和快速免疫金渗滤法(Dot-immuogold filtration assay DIGFA)，用于检测 HBsAg、HCG 和抗双链ＤＮＡ抗体等，具有简单、快速、准确和无污染等优点。
免疫胶体金技术的基本原理
　　氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下，可聚合成一定大小的金颗粒，形成带负电的疏水胶溶液。由于静电作用而成为稳定的胶体状态，故称胶体金。胶体金标记，实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。吸附机理可能是胶体金颗粒表面负电荷，与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。用还原法可以方便地从氯金酸制备各种不同粒径、也就是不同颜色的胶体金颗粒。这种球形的粒子对蛋白质有很强的吸附功能，可以与葡萄球菌Ａ蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白多肽缀合物等非共价结合，因而在基础研究和临床实验中成为非常有用的工具。
　　免疫金标记技术(Immunogold labelling techique) 主要利用了金颗粒具有高电子密度的特性，在金标蛋白结合处，在显微镜下可见黑褐色颗粒，当这些标记物在相应的配体处大量聚集时，肉眼可见红色或粉红色斑点，因而用于定性或半定量的快速免疫检测方法中，这一反应也可以通过银颗粒的沉积被放大，称之为免疫金银染色。

作者: rrra6 时间: 2016-5-2 10:19 标题: 【回复】

蛋白上的巯基能否连在纳米金上啊？

作者: wawa11 时间: 2016-5-2 10:20 标题: 【回复】

应该能，S一般都用来稳定Au

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