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标题: 【转载】一般用狭缝几做荧光呢？ [打印本页]

作者: jiushi 时间: 2016-5-2 14:57 标题: 【转载】一般用狭缝几做荧光呢？

狭缝的大小对荧光的强度很重要，大家用多大做呢？

作者: adg 时间: 2016-5-2 14:58

狭缝大小可根据你所测物质的荧光大小适当的调整。在一浓度在，如荧光过大，超过量程，可调整狭缝来调整荧光强度

作者: ass 时间: 2016-5-2 14:58

不能仅凭狭缝的大小来改变荧光强度，还要考虑分辨率的问题。

对于激发侧而言，狭缝加大有时荧光强度反而减少。

对于荧光侧而言，狭缝加大可以使荧光强度提高同时重现性得到提高，但是分辨率随之降低。

作者: happydream 时间: 2016-5-2 14:59

不能仅凭狭缝的大小来改变荧光强度，还要考虑分辨率的问题。

对于激发侧而言，狭缝加大有时荧光强度反而减少。

----仪器的PMT电压会和激发狭缝大小成反比关系，

----你可以自己设计衰减片来手动达到目的。

对于荧光侧而言，狭缝加大可以使荧光强度提高同时重现性得到提高，但是分辨率随之降低。

----实际是荧光峰的带宽发生了变化，和紫外可见光度计一样。

----仪器一般还可以手动调节PMT高压的档位或手动设置衰减。

作者: iop 时间: 2016-5-2 14:59

常用1nm或5nm.

作者: jiankufanhan 时间: 2016-5-2 14:59

狭缝的宽度对荧光粉的发光强度是很重要的！

我们实验室有的时候多采用3 nm的！

作者: nmn 时间: 2016-5-2 15:01

针对这句话“仪器的PMT电压会和激发狭缝大小成反比关系”，我有个疑问，我们实验室用的是瓦里安的cary eclipse荧光光度仪，PMT电压和激发狭缝都可以单独调节，貌似没有什么关系。

作者: shuishui 时间: 2016-5-2 15:02

请问怎么调节PMT的电压？

作者: teddy 时间: 2016-5-2 15:02

pmt电压，不是有选择项的吗？？？例如 400 700 250 等等

作者: vbnm 时间: 2016-5-2 15:02

在荧光分光光度计中：光电倍增管的工作电压与仪器的狭缝确实是成反比关系。但是有个前提，就是“当荧光值保持不变时”。

这个关系从实验中很容易判断出来；无论改变那一侧的狭缝，当负高压不变时，荧光值均会下降，要想回到原值，则必须提高复高压。反之则反。

其实，狭缝与光电倍增管负高压的反比关系，不仅仅存在荧光仪上，在紫外可见分光广度计，原子吸收或红外光谱仪上也是一样的，只不过届时的负高压是自动调整的，使用者不会太关注罢了。

作者: 艰苦奋斗 时间: 2016-5-2 15:03

1nm的狭缝是不经常使用的，因为荧光不是紫外可见分光光度计，荧光的信号很弱；如果使用过小的狭缝势必造成加大负高压的结果，那样，测试结果的噪声就会无形中被放大，这是我们所不希望的。

一般而言，5nm的狭缝是较为合适的；除非使用者有特殊的要求。

作者: 风往尘香 时间: 2016-5-2 15:03

在狭缝已经设定合适的前提下，负高压的选择主要是依据荧光值的强度而定。一般而言，如果荧光值可以适中地读出（例如强度在20左右即可），则高压设定的越小越好。这样可以避免将光电倍增管的暗电流或噪声也被同时放大的弊病。

作者: jiushi 时间: 2016-5-2 15:04

一般狭缝设置在1nm，如果光强度较弱或较强的话，则会增大或减小狭缝大小。

作者: adg 时间: 2016-5-2 15:04

5nm的话，未校正的发射光谱的强度会超过2000000，那么相应的经过校正的发射光谱则会被认为可信度不高。

作者: ass 时间: 2016-5-2 15:05

嘿嘿，狭缝的大小也没有定值，要根据样品的荧光发射特性而定，不同的仪器也可能会有不同的设置。

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