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标题: 【转载】：【求助】日立的f4500荧光分光光度计 [打印本页]

作者: teddy 时间: 2016-5-2 15:15 标题: 【转载】：【求助】日立的f4500荧光分光光度计

例如使用日立的f4500荧光分光光度计，测试固体样品，设定激发波长在254nm，在发射光谱中在510nm左右出现了一个不属于样品的尖锐的峰，不知道如何去除这个峰，因为样品的发射峰也在这个谱段，这个尖锐的峰在样品的两个发射峰之间。

作者: vbnm 时间: 2016-5-2 15:15

(1)510nm的峰是激发波长254nm的二级散射光谱,也称为"鬼峰";

(2)如果可以清楚的区分样品峰和鬼峰,并不影响测定一般可以不用除去鬼峰;

(3)如果坚持要除去鬼峰可以使用带通滤光片;

作者: 艰苦奋斗 时间: 2016-5-2 15:16

收到，非常感谢

作者: 风往尘香 时间: 2016-5-2 15:16

我想问一下你选择254NM激发波长是根据什么选的我想测激发和发射光谱，里面有个EXWL 和EMWL不知道怎么确定，谢谢指教啊

作者: jiushi 时间: 2016-5-2 15:16

根据测的荧光粉决定的。这两个值一般选择激发和发射光谱的峰值。如果应用于固定的激发源，则根据激发源的发射峰值来确定。

作者: adg 时间: 2016-5-2 15:17

你好谢谢你的回答由于是第一次接触所以不是很懂能否再给予充分说明一下比如如何找最大激发和发射峰谢谢

作者: ass 时间: 2016-5-2 15:17

一、点击“方法”图标。在打开的框图中，点击“一般” 图标，选择“波长扫描”方式；点击“仪器”图标，选择扫描方式为“发射”，固定激发波长为某一整数值X（我常设为300），发射扫描开始波长为“X + 20”nm，发射扫描结束波长为“2X－20”nm，但发射扫描结束波长最大不超过900nm。

二、点击“测量”图标，开始进行发射光谱扫描。仪器结束扫描后自动给出相应的测量参数和最大发射波长及对应的荧光强度。

三、点击“方法”图标。在打开的框图中，点击“仪器”图标，选择扫描方式为“激发”，发射波长选择刚才所得的最大发射波长数值Y，激发扫描开始波长为“1/2Y + 20”nm，激发扫描结束波长为“Y－20”nm。

四、点击“测量”图标，开始进行激发光谱扫描。仪器结束扫描后自动给出相应的测量参数和最大激发波长及对应的荧光强度。

五、将激发波长设为“八、”确定的数值。重复“1、”至“4、”的步骤。直至获得的激发波长和发射波长的数值不再明显改变为止。

作者: happydream 时间: 2016-5-2 15:18

论坛里有很多关于如何确定激发波长和发射波长的帖子，楼上的如果想知道可以看一下，虽然各仪器不同，但所用的原理都是一样的。改变发射波长最大发射波长的位置几乎不变（因为仪器自身原因可能会有一点变化）。如果变化很大，说明不是你要的荧光峰。悬浮液会加大散射的。可以把被测物质提取出来。

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