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标题: 样品极性有点大，反相柱会不会好分点？ [打印本页]

作者: ccssqq 时间: 2011-11-22 14:45 标题: 样品极性有点大，反相柱会不会好分点？

我分的样品极性有点大，TLC展开用氯仿甲醇水 7:3:0.5 硫酸乙醇显色 D101大孔树脂50 75 95洗下来的点传了个图上来，用正相硅胶回收率70%左右，我想问用反相柱会不会好分点？？
我看很多人说极性大的东西用ODS分比较好，但是ODS貌似也有好多种吧？有人用过吗，真心请教，我不知道选哪种好啊，我分的样品里估计黄酮类，酚类的东西比较多把，做了2个多月了，还是没点进展啊，老板要求分单体来着。。。。。

希望大家多给点意见吧！！

作者: 小莲 时间: 2011-11-22 18:17 标题: 回复 #1 ccssqq 的帖子

用反相柱可以分，看上图用正相也可以。正相柱对极性化合物有较好的区分性，反相柱对非极性化合物有较好的区分性，你的样品属于中等极性。
ODS柱的本质都一样，只是做成商品时质量有差别。

作者: huhuiowen 时间: 2011-11-23 16:29

你的极性不大，可以利用ODS和硅胶反复，如果含黄酮类化合物可以用凝胶，ODS的分类一般按粒径来分的，色谱柱一般是5微米，普通柱层析一般用50微米，不然太细流速太慢

作者: 282850063 时间: 2011-11-23 16:33

就用ODS 50微米的反相硅胶就可以，需要跑加压柱，否则流速太慢，
且分离效果差，高压等于高效嘛。
估计你样品里含有酚羟基较多，所以会有大量样品吸附在正相硅胶上，
最好先过一遍正相在上反相，可以试试加入甲酸或乙酸，我加甲酸一般不会超过0.5%。正相硅胶最好别用含水试剂，否则就变成分配柱层析了，上样量减小。

作者: ccssqq 时间: 2011-11-24 09:46

回复4楼，你是说ODS分离效果也不好么
甲酸我试过了，不如加水的效果好。。

厂家给我一份ods柱材的材料，有YMC的，还有GH GEL的，还有一堆孔径啊，粒径啊的，一般怎么选好呢？

我这两天单独把黄色斑点（用正丁醇萃取得到）上了下液相，等度，用的sb-c18的柱子，感觉分离效果也不好，一加大进样量，峰就变了，要不就开叉了要不就合了。。
这时不时说明sb-c18不好分我的样品啊

作者: ccssqq 时间: 2011-11-24 11:18 标题: 回复 #3 huhuiowen 的帖子

我的样品中含有黄酮类的。。
请问这样ODS选用哪种型号的比较好呢？

我这两天单独把黄色斑点（用正丁醇萃取得到）上了下液相，等度，用的sb-c18的柱子，感觉分离效果也不好，一加大进样量，峰就变了，要不就开叉了要不就合了。。
这时不时说明sb-c18不好分我的样品啊

作者: yinshengxu 时间: 2011-11-24 11:20

一般柱层析ODS都是50微米的，

作者: 282850063 时间: 2011-11-25 13:56

我用的是YMC的，别的型号我真不是太清楚，YMC感觉不错。
也不一定说sb-c18就一定不好。估计还是样品太杂，如果你觉得过
正相好，就先跑根小柱子试试，液相观察样品是不是死吸附了，如果
只是死吸附5%-10%就没什么关系。

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