标题:
ELISA方法进行抗体检测求助
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作者:
17685573913
时间:
2018-3-19 09:14
标题:
ELISA方法进行抗体检测求助
各位技术达人,在用ELISA方法进行
抗体检测
的时候经常会遇到这样一个问题,就是显色后空白对照的数值会特别高!一开始我以为是某个溶液染菌,所以都是当天配制当天进行ELIS检测。但是在这种情况下还是会出现本底高的情况。我包被用到的是重组抗原,封闭用的BSA,一抗都是兔血清多抗,二抗是羊抗兔二抗。在此请各位大侠指导。
作者:
15102767457
时间:
2018-3-27 15:05
标题:
建议
首先不知道你针对重组抗原的效价怎么样,效价是不是本身也很高呢?
做ELISA出现本底高的情况,可能是包被抗原过量,不知道你的包被量,另外洗涤也会很大程度影响空白对照的数值,洗涤充不充分,是否快速多次洗涤呢。
建议:包被量一般在100ng就足够了,快速多次洗涤,每次洗板子不要太长时间;封闭的话用BSA也可以的,但是建议换成5%的脱脂牛奶,可能会改善,祝实验顺利
作者:
Kiwi2021
时间:
2022-6-17 13:43
建议:包被量一般在100ng就足够了,快速多次洗涤,每次洗板子不要太长时间;封闭的话用BSA也可以的,但是建议换成5%的脱脂牛奶,可能会改善,祝实验顺利
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